临床研究
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世界华人消化杂志. 2008-11-28; 16(33): 3752-3758
Published online 2008-11-28. doi: 10.11569/wcjd.v16.i33.3752
乙型肝炎肝硬变患者外周血和肝组织中HBV cccDNA的定量检测
李莹, 韩涛, 高英堂, 刘磊, 王毅军, 景丽, 张涛, 杜智
李莹, 韩涛, 高英堂, 刘磊, 王毅军, 景丽, 张涛, 杜智, 天津医科大学三中心临床学院 天津市人工细胞重点实验室 天津市 300170
李莹, 医师, 医学硕士, 主要从事肝病基础与临床研究.
基金项目: 天津市科委应用基础研究计划面上项目, No. 06YFJMJC13100; 天津市重点科技攻关专项资助项目, No. 05YFSJSF02500; 国家重点基础研究发展规划(973计划)资助项目, No. 2007CB512801.
作者贡献分布: 此课题由韩涛与高英堂设计; 研究过程由韩涛、高英堂、李莹、刘磊及张涛完成; 研究所使用的试剂及分析工具由高英堂、杜智、王毅军、李莹及景丽提供; 数据分析由韩涛与李莹完成; 本论文写作由李莹、韩涛及高英堂完成.
通讯作者: 韩涛, 300170, 天津市津塘路83号, 天津市第三中心医院肝内科. hantaomd@126.com
电话: 022-84112298
收稿日期: 2008-10-08
修回日期: 2008-10-30
接受日期: 2008-11-03
在线出版日期: 2008-11-28
Abstract

目的: 研究乙型肝炎肝硬变患者HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)在肝组织和外周血中的分布及临床应用.

方法: 选取60例乙型肝炎肝硬变患者肝组织和外周血样本, 外周血样本以不降解质粒的ATP依赖的DNA酶(PSAD)进行酶切, 肝组织样本以限制性内切酶MluⅠ联合PSAD酶切, 而后进行荧光定量PCR检测.

结果: 60例乙型肝炎肝硬变患者外周血HBV cccDNA均阴性, 肝组织HBV cccDNA阳性24例(40.00%), 在HBeAg(+)组、HBeAg(-)HBeAb(-)组、HBeAb(+)组分布分别为66.67%、52.94%和26.47%, 定量结果在3组呈递减趋势, 且HBeAg(+)组与HBeAb(+)组差异存在统计学意义(P<0.05). 肝组织HBV cccDNA占总HBV DNA 0%-7.77%, 肝组织HBV cccDNA与肝组织总HBV DNA存在相关性(r = 0.53, P<0.01), 与外周血总HBV DNA无相关性(r = 0.18, P = 0.18), 与ALT、TBIL均无相关性(r = 0.15, P = 0.25; r = 0.01, P = 0.94).

结论: 乙型肝炎肝硬变患者外周血检测不到HBV cccDNA, 肝组织HBV cccDNA占总HBV DNA比例较低, HBeAg(+)患者病毒复制最为活跃.

Keywords: 肝硬变; 乙型肝炎病毒; 共价闭合环状DNA; 实时荧光定量PCR