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大肠癌细胞系Lovo中亚群(SP)细胞的分离培养和鉴定
王锡山, 刘彦龙, 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院腹外科 黑龙江省哈尔滨市 150040
杨艳梅, 黑龙江省肿瘤研究所 黑龙江省哈尔滨市 150040
王锡山, 教授, 博士生导师, 主要从事腹部肿瘤的基础研究和外科治疗.
通讯作者: 王锡山, 150040, 哈尔滨市南岗区哈平路150号, 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院腹外科. wxshan1208@yahoo.com.cn
电话: 0451-86298898
收稿日期: 2007-01-23
修回日期: 2007-01-04
接受日期: 2007-01-31
在线出版日期: 2007-03-28
修回日期: 2007-01-04
接受日期: 2007-01-31
在线出版日期: 2007-03-28
Abstract
目的: 应用无血清培养液(SFM)培养Lovo细胞系, 克隆分离具有干细胞样特性SP细胞.
方法: 应用SFM培养Lovo细胞, 分离成球样生长的细胞群作为SP细胞, 并通过有限稀释, 分化, 自我更新, 含血清培养基(SSM)和SFM交替培养及Musashi-1化学染色方法来鉴定SP细胞.
结果: Lovo细胞中约含有0.54%-0.62%的SP能够在无血清培养基中能够存活、增殖, 形成悬浮的肿瘤细胞球; 在SFM中加入血清可促使SP细胞分化; SP细胞可以连续传代, 并可交替培养于SSM和SFM中, 细胞形态无明显变化; SP细胞Musashi-1染色阳性.
结论: 应用SFM可从Lovo细胞中分离出极少量的具有干细胞特性的SP细胞.
Keywords: Lovo大肠癌细胞系; 细胞亚群; 肿瘤干细胞; 悬浮培养; 无血清培养基