基础研究
Copyright ©The Author(s) 2007. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2007-12-18; 15(35): 3685-3689
Published online 2007-12-18. doi: 10.11569/wcjd.v15.i35.3685
5-脂氧合酶抑制TNF-α诱导的胰腺癌细胞凋亡
丁晓凌, 周国雄, 黄介飞
丁晓凌, 周国雄, 黄介飞, 南通大学附属医院消化内科 江苏省南通市 226001
丁晓凌, 2006年南通大学医学硕士研究生毕业, 讲师, 主治医师, 主要从事胰腺癌诊断和治疗研究.
基金项目: 江苏省自然科学基金资助项目, No. BK2004049.
通讯作者: 周国雄, 226001, 江苏省南通市西寺路20号, 南通大学附属医院消化内科. guoxiong_zhou@163.com
收稿日期: 2007-06-16
修回日期: 2007-10-23
接受日期: 2007-12-05
在线出版日期: 2007-12-18
Abstract

目的: 检测胰腺癌细胞中5-脂氧合酶(5-lipoxygenase, 5-LOX)及其代谢产物的表达情况, 分析高表达5-LOX及LTB4对胰腺癌细胞生长凋亡的影响.  

方法: 体外培养人胰腺癌细胞株ASPC-1, PANC-1和SW1990, 并构建5-LOX基因稳定转染细胞株. 用RT-PCR和Western blot检测细胞5-LOX mRNA和蛋白的表达, ELISA检测细胞培养上清中LTB4的含量, 采用流式细胞仪、Annexin V/PI双染法检测TNF-α诱导细胞的细胞凋亡. 

结果: 三种胰腺癌细胞株均表达5-LOX mRNA和蛋白, 细胞上清中也都检测到一定量LTB4分泌. 5-LOX基因稳定转染细胞株表达5-LOX和LTB4的水平上升. TNF-α(20 μg/L)处理野生型SW1990细胞, 12和24 h后凋亡率分别为25.4%±3.65%和43.5%±5.23%, 但该效应在高表达5-LOX的细胞株中明显减弱, 分别为13.2%±2.01%和21.7%±3.65%. 在野生型SW1990细胞培养中加入外源性LTB4(10 nmol/L)能抑制TNF-α诱导的细胞凋亡, 野生型与处理组细胞24 h后凋亡率有显著性差异(47.6%±5.32% vs 18.5%±5.69%, P<0.01). 用LTB4受体阻断剂处理5-LOX高表达细胞株, 能恢复其对凋亡诱导的敏感性.

结论: 胰腺癌细胞均能表达5-LOX并产生LTB4, 高表达5-LOX能抑制TNF-α诱导的胰腺癌细胞凋亡.

Keywords: 胰腺癌; 5-脂氧合酶; 肿瘤坏死因子-a; 凋亡; 免疫印迹法; 逆转录聚合酶链式反应