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世界华人消化杂志. 2007-10-08; 15(28): 2990-2994
Published online 2007-10-08. doi: 10.11569/wcjd.v15.i28.2990
Published online 2007-10-08. doi: 10.11569/wcjd.v15.i28.2990
靶向S区和C区基因的M1GS RNA核酶共同抑制HBV的表达
毛涛, 刘希双, 张海燕, 青岛大学医学院附属医院内镜诊疗科 山东省青岛市 266003
殷凡, 青岛市疾病预防控制中心毒理室 山东省青岛市 266033
田字彬, 厉海妮, 孔心涓, 青岛大学医学院附属医院消化内科 山东省青岛市 266003
毛涛, 2006年青岛大学医学院硕士生, 主要从事乙型肝炎和消化道肿瘤的基础和临床研究.
通讯作者: 毛涛, 266003, 山东省青岛市江苏路16号, 青岛大学医学院附属医院内镜诊疗科. maotaoqy@163.com
电话: 0532-82911525
收稿日期: 2007-05-27
修回日期: 2007-09-28
接受日期: 2007-09-28
在线出版日期: 2007-10-08
修回日期: 2007-09-28
接受日期: 2007-09-28
在线出版日期: 2007-10-08
Abstract
目的: 研究靶向HBV S区和C区基因的M1GS RNA核酶共同作用对HBV基因表达的影响.
方法: 选择HBV ayw亚型S区基因294 nt和C区基因2333 nt为切割位点, 以含有编码M1 RNA的DNA序列的质粒pTK117为模板, 通过PCR扩增得到M1GS RNA核酶的DNA模板, 并将其克隆至真核表达载体pEGFP-C1得到重组质粒pEGFP-GSS和pEGFP-GSC. 将2个重组质粒共转染HepG2.2.15细胞, 转染后ELISA法测细胞培养液中的HBsAg和HBeAg, RT-PCR检测HBV mRNA.
结果: 成功构建了分别靶向HBV S区基因和C区基因的真核表达载体. 共转染HepG2.2.15细胞后, HBsAg和HBeAg的表达分别被抑制了33.2%和39.1%, HBV C mRNA和S mRNA分别被抑制了32.5%和29.7%, 而HepG2.2.15细胞的增殖无明显变化.
结论: 靶向HBV S区和C区基因的M1GS RNA核酶共同作用可特异性抑制HBV S区和C区基因的表达.
Keywords: 乙型肝炎病毒; 核酶; 核糖核酸酶P; 基因治疗; 逆转录聚合酶链式反应; 酶联免疫吸附试验