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世界华人消化杂志. 2007-09-28; 15(27): 2914-2917
Published online 2007-09-28. doi: 10.11569/wcjd.v15.i27.2914
Published online 2007-09-28. doi: 10.11569/wcjd.v15.i27.2914
应用噬菌体展示技术筛选原发性肝癌血清结合蛋白
刘志英, 魏红山, 张黎颖, 成军, 北京地坛医院传染病研究所 北京市 100011
通讯作者: 魏红山, 100011, 北京市东城区安外大街地坛公园13号, 北京地坛医院传染病研究所. dr_liver@hotmail.com
电话: 010-64211031-2358
收稿日期: 2007-04-16
修回日期: 2007-09-13
接受日期: 2007-09-28
在线出版日期: 2007-09-28
修回日期: 2007-09-13
接受日期: 2007-09-28
在线出版日期: 2007-09-28
Abstract
目的: 通过筛选原发性肝癌血清蛋白结合蛋白, 探究肝癌的分子发病机制.
方法: 应用噬菌体展示技术, 以肝癌患者的血清作为固相筛选分子, 对T7 Select 噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选过程, 经噬斑的聚合酶链式反应(PCR)扩增后, 对阳性PCR产物直接进行序列测定和同源性分析.
结果: 噬菌体经富集后, 随机挑取48个噬斑进行PCR扩增, 得到5种大小不同的PCR片断, 序列测定后经序列同源性分析, 结果发现与肝癌患者血清蛋白结合的蛋白有以下5种: 人核仁螺旋体磷酸化蛋白NOLC1, 人高度迁移基核小体结合域1(HMGN1), 人依赖ATP的DNA连接酶1(LIG1), 人小EDRK-丰富因子2(SERF2)和A-kinase anchor protein 9 isoform.
结论: 用噬菌体人肝cDNA文库筛选得到了肝癌血清蛋白结合蛋白, 为进一步阐明肝癌的发生及发病机制奠定了基础.
Keywords: 噬菌体展示技术; 肝癌; 血清结合蛋白; 筛选; 基因测序