基础研究
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世界华人消化杂志. 2007-05-28; 15(15): 1682-1687
Published online 2007-05-28. doi: 10.11569/wcjd.v15.i15.1682
幽门螺杆菌靶向核酸疫苗的构建及免疫学评价
张瑞平, 刘纯杰, 陶好霞, 张兆山
张瑞平, 刘纯杰, 陶好霞, 张兆山, 军事医学科学院生物工程研究所 北京市 100071
张瑞平, 讲师, 在读博士, 主要从事基因工程疫苗研究.
基金项目: 国家高技术研究发展计划(863)资助项目, No. 2004AA215213.
通讯作者: 张兆山, 100071, 北京市丰台区东大街20号, 军事医学科学院生物工程研究所四室. zhangzs@nic.bmi.an.cn
电话: 010-66948834
收稿日期: 2007-01-25
修回日期: 2007-04-01
接受日期: 2007-04-02
在线出版日期: 2007-05-28
Abstract

目的: 为了提高幽门螺杆菌DNA疫苗的免疫原性, 构建具有靶向作用于APC细胞的核酸疫苗.

方法: 利用基因工程技术, 将靶向基因片段和过氧化氢酶基因融合构建了核酸疫苗. 体外转染293T细胞, 间接免疫荧光和ELISA检测其基因表达情况. 用该核酸疫苗肌肉免疫注射BALB/c小鼠后, 测定其血清IgG、IgG1和IgG2a水平.

结果: 间接免疫荧光检测转染DNA疫苗的293T细胞, 表明该疫苗能在真核细胞中表达目的抗原, 通过ELISA方法测定表明其仍具有IgG抗体结合能力. BALB/c小鼠免疫后血清测定结果表明, 该靶向核酸疫苗诱导的抗体水平高于对照质粒pDNAkat, 抗体分型实验显示靶向核酸疫苗pcDNAkathIgz和pcDNAkat, 促进了免疫反应类型由Th2向Th1的部分偏转.

结论: 成功构建了靶向APC细胞的幽门螺杆菌核酸疫苗, 并在小鼠体内诱导了较高的抗体水平.

Keywords: 幽门螺杆菌; 核酸疫苗; 靶向免疫; 间接免疫荧光; 酶联免疫吸附试验