修回日期: 2005-12-12
接受日期: 2005-12-19
在线出版日期: 2006-02-18
目的: 研究丹酚酸B的抗氧化性对大鼠肝星状细胞(HSC)的影响.
方法: 采用原位灌注法消化大鼠肝脏, 108 g/L Nycodenz密度梯度离心, 分离肝星状细胞, 分别以不同浓度MDA/SAB处理细胞, MTT法观察细胞的增殖能力, 2', 7'-二氯二氢荧光素(DCFH)掺入反映细胞内氧化水平, Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白含量, 免疫组化法检测PDGFR含量.
结果: MDA刺激后, 细胞增殖明显增强, MTT结果显示, 吸光度与对照组相比显著升高(0.253±0.016 vs 0.213±0.004, P< 0.05), 而1 μmol/L SAB(0.182±0.006, P< 0.01)和10 μmol/L SAB(0.179±0.006, P<0.01)均可以显著抑制MDA刺激的HSC增殖. Western blot显示, PCNA蛋白在MDA刺激后明显增加(1.72±0.026 vs 1.223±0.025, P< 0.01), 而1和10 mmol/L SAB可显著抑制PCNA蛋白表达的升高(分别是1.080±0.040和1.066±0.025, P<0.01). MDA可明显刺激细胞PDGF受体的表达(5.5±0.653 vs 对照组3.3±0.616, P<0.01), 提高HSC细胞内氧化水平(荧光强度: 4.721±0.385 vs 对照组2.413±0.662, P< 0.01), 10 mmol/L SAB则可抑制PDGF受体的表达(2.723±0.326)和降低细胞内的氧化水平(3.324±0.264)(P<0.01).
结论: 丹酚酸B可通过影响PDGF信号通路而抑制体外培养HSC的增殖, 且这种抑制作用与丹酚酸B的抗氧化作用有关.