研究快报
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世界华人消化杂志. 2006-07-28; 14(21): 2135-2138
Published online 2006-07-28. doi: 10.11569/wcjd.v14.i21.2135
尾静脉液压法注射转hIL-10在大鼠肝组织中的表达
成峰, 王学浩, 肇毅, 黄蓬
成峰, 王学浩, 南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心 江苏省南京市 210029
肇毅, 南京医科大学第一附属医院普通外科 江苏省南京市 210029
黄蓬, 南京医科大学动物实验中心 江苏省南京市 210029
通讯作者: 成峰, 210029, 江苏省南京市广州路300号, 南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心. docchengfeng@sohu.com
电话: 025-83718836-6476 传真: 025-83672106
收稿日期: 2006-05-05
修回日期: 2006-05-20
接受日期: 2006-05-29
在线出版日期: 2006-07-28
Abstract

目的: 采用尾静脉液压法注射SB转座元(sleeping beauty transposon)系统转人类白细胞介素10 (human interleukin-10, hIL-10)在大鼠肝组织中的表达.

方法: 采用Ringers溶液20 mL经尾静脉10-12 s内快速注射. 实验分组: Ringers 20 mL对照组、DOTAP 100 μg空白组、DOTAP 100 μg+pT-hIL-10 50 μg转基因组、pT-hIL-10 50 μg+pCMV-SB 5 μg共注射组(每组n = 6). 尾静脉注射后采血检测肝功能和转基因组血清中hIL-10的表达. RT-PCR法检测转基因组术后7, 14 d肝组织中hIL-10 mRNA的表达.

结果: 尾静脉注射后1, 4, 7 d Ringers 20 mL组、DOTAP组、DOTAP+pT-hIL-10组、pT-hIL-10+pCMV-SB共注射组ALT水平分别为: 4339±602, 13 516±535, 6576±347, 4451±465; 984±125, 4087±600, 2117±243, 1158±130; 592±85, 2339±300, 1384±165, 40±663 nkat/L. DOTAP+pT-hIL-10组、pT-hIL-10+pCMV-SB共注射组术后1, 4, 7, 14 d血清hIL-10浓度分别为: 818.3±24.9, 640.7±20.6, 441.3±25.4, 322.3±15.4和1008.3±65.8, 820.8±20.9, 675.8±31.6, 438.2±26.0 μg/L, 两组相比有显著差异(P<0.01). 转座元转基因组2 wk后仍有hIL-10 mRNA表达, 高于DOTAP转基因组.

结论: 尾静脉液压法注射转hIL-10可在大鼠肝组织中较长时间表达, 联合SB转座元系统转hIL-10可提高转基因的效率.

Keywords: 尾静脉液压法; 人类白细胞介素10; SB转座元; 大鼠