基础研究
Copyright ©The Author(s) 2006. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2006-07-08; 14(19): 1864-1869
Published online 2006-07-08. doi: 10.11569/wcjd.v14.i19.1864
HBV抗原基因修饰树突状细胞疫苗体外抗HBV的作用
黄呈辉, 欧阳玲, 黄建国, 黎淦平, 江鹏飞, 姚集鲁
黄呈辉, 欧阳玲, 黄建国, 黎淦平, 深圳市宝安区中心血站研究室 广东省深圳市 518101
江鹏飞, 深圳市龙华人民医院内科 广东省深圳市 518109
姚集鲁, 中山大学附属第三医院感染科 广东省广州市 510630
黄呈辉, 1990年江西医学院学士, 1997年首都医科大学硕士, 2003年中山大学中山医学院博士, 副主任医师, 主要从事病毒性肝炎研究工作.
基金项目: 深圳市科技计划资助课题, No. 200204157和2005157.
通讯作者: 黄呈辉, 518101, 广东省深圳市宝安区新城龙井路16区, 深圳市宝安区中心血站研究室. chuih67@163.com
电话: 0755-27751196 传真: 0755-27751196
收稿日期: 2006-04-03
修回日期: 2006-04-12
接受日期: 2006-04-24
在线出版日期: 2006-07-08
Abstract

目的: 探讨腺病毒载体介导HBV抗原基因修饰的树突状细胞(DCs)诱导抗HBV特异性CTL反应.

方法: 制备携带HBsAg、HBeAg和HBcAg基因的3种重组腺病毒Ad-HBs, Ad-HBe, Ad-HBc, 分别转染自脐带血体外诱导培养的DCs, 观察腺病毒转染DCs效率和DCs中HBV抗原的表达; 混合淋巴细胞反应(MLR)测定HBV抗原基因修饰DCs刺激同种异体T淋巴细胞增殖能力; 乳酸脱氢酶释放法检测特异性CTL细胞对HepG222.1.5靶细胞的杀伤能力.

结果: 腺病毒载体能够高效介导HBV三个抗原基因在DCs中表达, 90%以上DCs表达示踪基因EGFP, 且DCs细胞形态完整; 感染后72 h HBsAg和HBeAg含量分别为0.919和0.328(吸光度A值). MLR实验显示, HBV抗原基因修饰DCs仍然具有刺激同种异体T细胞的增殖能力, Ad-HBs转染DCs组、Ad-HBe转染DCs组、Ad-HBc转染DCs组和未转染DCs组之间刺激T细胞的增殖水平无明显差异(F = 1.194, P = 0.389); 在E:T比例为2:1, 10:1和25:1时, Ad-HBs转染DC组、Ad-HBe转染DCs组和Ad-HBc转染DCs组对HepG222.1.5细胞的杀伤率均明显高于未转染DCs组(P<0.001); 以Ad-HBc转染DC组对HepG222.1.5细胞杀伤率最高.

结论: HBV抗原基因修饰DCs疫苗具有刺激同种异体T细胞增殖能力, 同时能增强抗HBV特异性CTL反应的能力, 可能发展为一种新型抗病毒疫苗.

Keywords: 乙型肝炎病毒; 抗原; 树突状细胞; T淋巴细胞; 细胞毒性; 腺病毒载体