修回日期: 2006-01-22
接受日期: 2006-02-08
在线出版日期: 2006-04-08
目的: 探讨表皮生长因子(EGF)诱导胆管癌细胞侵袭力的相关机制.
方法: 检测胆管癌细胞株HuCCT1在EGF不同浓度下的细胞侵袭力及细胞增殖情况; 采用RT-PCR及Western blot分析方法, 检测基质金属蛋白酶(MMPs)、尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)在不同EGF浓度下的基因和蛋白表达; 采用凝胶电泳迁移率试验(EMSA)检测核转录因子(nuclear factor kappa B, NF-κB)在不同EGF浓度下的活性; 并用NF-κB的抑制剂PDTC和布洛芬(ibuprofen)预先处理HuCCT1胆管癌细胞后, 检测其对HuCCT1胆管癌细胞侵袭力的影响.
结果: 随着EGF浓度的增加, 胆管癌细胞株HuCCT1侵袭细胞数也随之增加, 具有明显的浓度依赖性(EGF 10, 100 mg/L vs 0 mg/L: 35.4±6.2 vs 16.3±3.1, t = 4.77，P = 0.009; 57.2±7.6 vs 16.3±3.1, t = 8.63, P = 0.001), 而EGF浓度的变化对HuCCT1细胞的增殖无明显影响. EGF明显上调HuCCT1细胞中MMP-9、uPA和PAI-1的mRNA和蛋白表达水平, MMP-2不受影响. 随着EGF浓度的增加, NF-κB的活化明显增强; PDTC和布洛芬明显抑制EGF诱导的HuCCT1细胞侵袭力(46.6±4.6 vs 62.3±5.2, t = 3.168, P = 0.037; 35.3±5.4 vs 62.3±5.2, t = 6.30, P = 0.003).
结论: EGF能够增强胆管癌细胞的侵袭力, 其增强的侵袭力可能是通过NF-κB信号传导路径, 激活MMP-9, uPA和PAI-1等蛋白水解酶而实现的.