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半乳糖基化壳聚糖肝靶向性基因转导的体内实验
李剑平, 窦科峰, 陈勇, 鱼军, 杨雁灵, 赵青川, 乔庆, 中国人民解放军第四军医大学西京医院肝胆外科 陕西省西安市 710032
毛海泉, 新加坡约翰霍普金斯大学生物医学部 新加坡 138669
李剑平, 男, 1980-07-08生, 吉林省松原市人, 汉族. 硕士研究生, 主要从事器官移植研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30070210.
通讯作者: 陈勇, 710032, 陕西省西安市长乐西路127号, 中国人民解放军第四军医大学西京医院肝胆外科. gdwkcy@fmmu.edu.cn
电话: 029-83375259
收稿日期: 2005-02-17
修回日期: 2005-02-28
接受日期: 2005-03-03
在线出版日期: 2005-04-01
修回日期: 2005-02-28
接受日期: 2005-03-03
在线出版日期: 2005-04-01
Abstract
目的: 研究半乳糖基化壳聚糖(Galactosylated chitosan, GC)在狗体内的肝靶向性作用.
方法: GC与质粒pEGFP-N1混和制备成纳米微囊复合物, 体外转染SMMC-7721细胞. 杂种狗术前1 d静脉注射氯化钆(14 mg/kg)以清除Kupffer细胞. 将含1 mg质粒的纳米微囊经肝动脉和门静脉注射入动物体内.48 h后取主要脏器组织做冰冻切片, 在荧光显微镜下观察绿荧光蛋白表达情况. 以裸质粒作为对照.
结果: 7721细胞中有绿荧光蛋白的表达, 体内实验GC组肝组织中有绿荧光蛋白表达, 其他脏器组织中仅有微量表达.
结论: 半乳糖基化壳聚糖在体外有较高的转染率, 在大动物体内有肝靶向性作用, 肝动脉、门静脉联合给药是基因治疗的一种有效途径.
Keywords: 基因治疗; 肝靶向; 壳聚糖; 绿荧光蛋白