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端粒酶逆转录酶基因hTERT在肝细胞癌中的表达及端粒酶反义基因对人肝癌细胞HepG2细胞凋亡的影响
张东, 李开宗, 窦科峰, 宋振顺, 赵青川, 中国人民解放军第四军医大学西京医院肝胆外科 陕西省西安市 710032
张东, 男, 1966-4-24生, 新疆乌鲁木齐人, 汉族, 第四军医大学西京医院肝胆外科博士, 副主任医师.
通讯作者: 李开宗, 710032, 陕西省西安市, 中国人民解放军第四军医大学西京医院肝肝胆外科. zdong98@sina.com
电话: 029-83375561
收稿日期: 2004-06-19
修回日期: 2004-09-17
接受日期: 2004-10-11
在线出版日期: 2005-01-15
修回日期: 2004-09-17
接受日期: 2004-10-11
在线出版日期: 2005-01-15
Abstract
目的: 研究肝细胞癌(HCC)中端粒酶逆转录酶基因hTERT表达, 探讨其在HCC发生、发展及预后复发中的意义. 探讨抗端粒酶在肝细胞癌治疗中的意义.
方法: 采用免疫组化法检测42例HCC组织中hTERT的表达, 并对hTERT与临床病理特征的关系进行分析. 将反义hTR真核表达载体经脂质体介导转染人肝癌细胞系HepG2, 体外培养及接种裸鼠观察其基因转染细胞的细胞周期、超微结构变化及致瘤性.
结果: HCC中hTERT基因阳性率分别为71.4%(30/42); hTERT与在正常肝脏组织中阳性表达率0%相比, 有显著性差异(P<0.01). hTERT在I, II和Ⅲ级HCC中的表达率分别为40.0%(4/10), 70.0%(14/20), 100%(12/12). I与Ⅲ级、II与Ⅲ级比较差异显著(P<0.05). hTERT阳性表达率与患者复发有显著相关性(P<0.05). 形态学观察, 转染后HepG2细胞出现典型的凋亡现象. FCM检测发现G1期前出现凋亡峰. 在裸鼠皮下的致瘤性明显降低. 荷瘤鼠存活时间延长.
结论: hTERT表达异常可能与肝脏肿瘤的发生、发展有关. 检测hTERT表达可作为预测肝脏肿瘤预后复发的潜在指标. 提示HCC是由多基因参与的疾病. 转染端粒酶反义RNA能抑制肝癌HepG2细胞的恶性表型, 促进其凋亡.
Keywords: 端粒酶逆转录酶; 端粒酶反义基因; 肝细胞癌; 凋亡