Copyright
©The Author(s) 2005. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2005-08-28; 13(16): 1945-1950
Published online 2005-08-28. doi: 10.11569/wcjd.v13.i16.1945
Published online 2005-08-28. doi: 10.11569/wcjd.v13.i16.1945
p15INK4B基因转染对人食管鳞癌细胞EC109增殖的抑制作用
张学彦, 哈尔滨医科大学附属二院消化科 黑龙江省哈尔滨市 150086
刘铁夫, 哈尔滨医科大学附属一院消化科 黑龙江省哈尔滨市 150000
于旸, 哈尔滨医科大学遗传学教研室 黑龙江省哈尔滨市 150086
刘伟, 哈尔滨医科大学附属二院分子实验中心 黑龙江省哈尔滨市 150086
崔希威, 哈尔滨医科大学附属二院计算机中心 黑龙江省哈尔滨市 150086
张学彦, 男, 1973-11-18生, 黑龙江省肇东市人, 汉族, 2001年哈尔滨医科大学硕士, 2003年哈尔滨医科大学博士生, 主治医师, 主要从事消化系统肿瘤的防治研究.
基金项目: 黑龙江省卫生厅科研基金资助项目 , No. 2004-117 .
通讯作者: 张学彦, 150086, 黑龙江省哈尔滨市学府路246号, 哈尔滨医科大学附属二院消化科. zxycxw@sina.com
电话: 0451-86605143 传真: 0451-86695879
收稿日期: 2005-06-30
修回日期: 2005-07-01
接受日期: 2005-07-09
在线出版日期: 2005-08-28
修回日期: 2005-07-01
接受日期: 2005-07-09
在线出版日期: 2005-08-28
Abstract
目的: 探讨p15INK4B(p15)基因转染对食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖的影响.
方法: 根据转染质粒的不同和是否进行质粒转染分为3组: p15转染组, 空载体转染组, 未转染组.应用PCR检测外源性p15基因, Western blot方法检测转染细胞的P15蛋白变化; 流式细胞仪分析细胞周期变化, 应用MTT、集落形成实验、流式细胞仪和透射电镜检测转染外源p15基因对EC109细胞增殖和凋亡的影响.
结果: p15转染细胞存在外源p15基因, 并有P15蛋白高表达; EC109-p15细胞生长速度低于对照细胞EC109-空载体组和未转染组, 集落形成率显著低于对照细胞EC109-空载体组和未转染组(20.8±1.3% vs 54.3±3.2%, 56.8±2.3%, P<0.01); 流式细胞仪观察到P15蛋白高表达使EC109细胞发生G1/S阻滞, G1期细胞比例显著高于空载体组和未转染组(62.4±7.1% vs 38.0±5.8%, 34.4±1.0%, P<0.01), S期比例显著低于空载体组和未转染组(21.1±1.3% vs 35.5±2.4%, 36.3±0.7%, P<0.01), 并出现亚G1峰(凋亡峰). 透射电镜亦发现p15转染组发生细胞凋亡.
结论: p15基因转染可以抑制人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖并能诱导其发生细胞凋亡.
Keywords: p15INK4B; 基因转染; 食管鳞癌