基础研究
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世界华人消化杂志. 2005-01-01; 13(1): 39-43
Published online 2005-01-01. doi: 10.11569/wcjd.v13.i1.39
实时荧光定量检测HCV RNA含量的临床意义
张冬雷, 施健, 崔之础, 王惠民, 鞠少卿, 李立人, 倪红兵, 苏建友
张冬雷, 施健, 崔之础, 南通大学附属医院酶学研究室 江苏省南通市 226001
王惠民, 鞠少卿, 倪红兵, 苏建友, 南通大学附属医院检验医学中心 江苏省南通市 226001
李立人, 南通大学附属医院消化内科 江苏省南通市 226001
张冬雷, 男, 1976-01-21生, 江苏省南通市人, 汉族, 分子生物学专业硕士研究生, 讲师, 主要从事病毒和肿瘤免疫学研究.
通讯作者: 崔之础, 226001, 江苏省南通市西寺路20号, 南通大学附属医院酶学研究室. zdonglei@yahoo.com.cn
电话: 0513-5052483 传真: 0513-5052102
收稿日期: 2004-11-01
修回日期: 2004-11-07
接受日期: 2004-11-12
在线出版日期: 2005-01-01
Abstract

目的: 建立实时荧光定量RT-PCR(RFQ-RT-PCR)检测HCV RNA含量的方法, 初步探讨HCV RNA含量变化与病情的相关性.

方法: HCV抗体阳性样本80例, 包括慢性肝炎(CH)39例, 肝硬化(LC)23例, 肝癌(HCC)18例, 献血员样本40例为正常对照. 在HCV基因组5'非编码区(5'UTR)设计特异性引物和一对杂交探针, 构建相应基因片段载体, 体外转录RNA作为标准品, 根据其建立的标准曲线对血清HCV RNA进行定量, 同时用传统的套式RT-PCR进行定性分析.

结果: 本法检测HCV RNA含量的线性范围为1012-104copies/L, 批内和批间重复性测定的v分别为1.68-5.97%和6.40-10.58%. 在HCV抗体阳性患者中, 肝硬化和肝癌患者的HCV RNA含量显著高于慢性肝炎患者(7.75±0.29, 7.86±0.32 vs 4.67±0.41, P<0.05), 而且HCV RNA含量与ALT水平呈正相关(r = 0.89, t = 8.29, P<0.05).

结论: RFQ-RT-PCR检测HCV RNA含量具有较好的灵敏度和特异性, 其含量与丙型肝炎患者的病情变化及严重程度有一定相关性.

Keywords: HCV RNA含量; 实时荧光定量检测