基础研究
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世界华人消化杂志. 2004-09-15; 12(9): 2123-2126
Published online 2004-09-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i9.2123
人类抗凋亡基因survivin的克隆及其原核表达
杨欣艳, 王孟薇, 王刚石, 尤纬缔
杨欣艳, 北京军区总医院消化内科 北京市 100700
王孟薇, 王刚石, 尤纬缔, 中国人民解放军总医院西院消化科 北京市 100853
通讯作者: 杨欣艳, 100700, 北京市, 北京军区总医院消化内科.
电话: 023-68774905
收稿日期: 2002-03-19
修回日期: 2004-05-09
接受日期: 2002-05-11
在线出版日期: 2004-09-15
Abstract

目的: 克隆人类抗凋亡基因survivin(SVV), 实现SVV基因在大肠杆菌中的高效表达.

方法: 提取胃癌细胞系SGC-7901总RNA, RT-PCR扩增人SVV全长cDNA, 克隆于载体pGEM-T, 酶切、测序鉴定. 将人类SVV基因全长cDNA克隆入原核表达载体pRSET, 实现该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效表达.

结果: 得到人SVV基因全长cDNA, 经测序与SVV基因的已知序列相同, 原核表达所获融合蛋白经SDS-PAGE电泳与已知SVV基因的蛋白质表达产物大小相近.

结论: 克隆出人SVV基因的全长cDNA, 并克隆入原核表达载体pRSET, 并在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达.

Keywords: N/A