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传染性非典型肺炎患者不同病程粪便标本中SARS-CoV的分离与鉴定
田薇, 西安交通大学医学院卫生部法医学重点实验室 陕西省西安市 710061
邓亚军, 杭州华大基因研发中心 浙江省杭州市 310008
吴清发, 王绪敏, 杨玲, 张峰, 刘晨辉, 汪建, 杨焕明, 刘明旭, 中科院北京基因组研究所, 北京华大基因研究中心 北京市 101300
包其郁, 浙江大学沃森基因组科学研究院, 杭州华大基因研发中心 浙江省杭州市 310008
通讯作者: 刘明旭, 101300, 北京市, 北京空港工业开发区B-6, 北京华大基因研究中心. liumx@genomics.org.cn
电话: 010-80481102 传真: 010-80498676
收稿日期: 2003-12-12
修回日期: 2004-01-09
接受日期: 2004-01-13
在线出版日期: 2004-05-15
修回日期: 2004-01-09
接受日期: 2004-01-13
在线出版日期: 2004-05-15
Abstract
目的: 从粪便标本中分离并鉴定SARS-CoV.
方法: 粪便浸出液接种Vero-E6细胞, 盲传至出现明显的细胞病变效应(CPE), 并能稳定传代. 采用电镜法和RT-PCR技术鉴定细胞培养物中的SARS-CoV (本实验均在BSL-3实验室完成).
结果: 大部分样本用Vero-E6细胞盲传3代后发现明显的CPE, 并能稳定传代. 电镜负染检查, 出现CPE的细胞可查见病毒颗粒; 培养物上清RT-PCR扩增均为阳性. 粪便样本直接用RT-PCR检测, 阳性率仅为50%, 细胞培养的检出率为73%.
结论: 采用细胞培养结合RT-PCR技术检测粪便标本SARS-CoV比粪便标本直接RT-PCR的阳性率高.
Keywords: N/A