病毒性肝炎
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世界华人消化杂志. 2004-04-15; 12(4): 824-827
Published online 2004-04-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i4.824
血清类粘蛋白2下调乙型肝炎病毒表面抗原基因启动子I转录活性的研究
洪源, 成军, 杨倩, 刘妍, 王建军
洪源, 成军, 杨倩, 刘妍, 王建军, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 北京市 100039
洪源, 男, 1974-12, 福建省莆田市人, 汉族. 1998年毕业于第四军医大学军医系, 获医学学士学位, 2003年毕业于解放军军医进修学院, 获得内科传染病学硕士学位, 主要课题方向是肝炎病毒与肝细胞相互作用的分子生物学机制.
基金项目: 国家自然科学基金攻关项目, No. C03011402, No. C30070689; 军队"九、五"科技攻关项目, No. 98D063; 军队回国留学人员启动基金项目, No. 98H038; 军队"十、五"科技攻关青年基金项目, No. 01Q138; 军队"十、五"科技攻关面上项目, No. 01MB135.
通讯作者: 成军, 100039, 北京市西四环中路100号, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室. cj@genetherapy.com.cn
电话: 010-66933392 传真: 010-63801283
收稿日期: 2003-11-13
修回日期: 2003-12-01
接受日期: 2003-12-16
在线出版日期: 2004-04-15
Abstract

目的: 探讨血清类粘蛋白2(ORM2)对乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原基因启动子Ⅰ(HBV-SP Ⅰ)转录的激活作用.

方法: 以我实验室前期得到的HBV-SP Ⅰ的酵母单杂交系统筛选结果为基础, 利用生物信息学技术确定ORM2的基因编码区域, 聚合酶链反应(PCR)扩增ORM2编码基因, 克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-)中, 构建pcDNA3.1(-)-ORM2载体; 将该质粒与SP Ⅰ的氯霉素乙酰转移酶(CAT)报告载体pCAT3-SP Ⅰ共转染肝癌细胞系HepG2细胞系, 并以pCAT3-SP Ⅰ单独转染HepG2细胞系作为对照, 酶联免疫黏附法(ELISA)检测CAT的表达活性.

结果: pCAT3-SP Ⅰ在HepG2细胞中能够启动CAT的表达; 共转染实验中pCAT3-SP Ⅰ+pcDNA3.1(-)-ORM2组CAT的表达活性较pCAT3-SP Ⅰ下降了81.9%.

结论: ORM2蛋白具有对HBV-SP Ⅰ的反式抑制作用. 本实验验证了我室利用酵母单杂交技术筛选HBV-SP Ⅰ特异结合蛋白的结果, 为进一步了解HBV-SP Ⅰ的转录调控机制及其与SP I结合的反式作用因子提供了新的线索.

Keywords: N/A