病毒性肝炎
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世界华人消化杂志. 2004-04-15; 12(4): 801-804
Published online 2004-04-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i4.801
丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活基因2基因组DNA结构分析及其不同剪切体的克隆化研究
杨倩, 成军, 刘妍, 洪源, 王建军, 张树林
杨倩, 张树林, 西安交通大学第一医院传染科 陕西省西安市 710061
成军, 刘妍, 洪源, 王建军, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 北京市 100039
杨倩, 女, 1970-11-06, 广西桂平人, 汉族, 1999年毕业于西安医科大学, 获硕士学位, 目前在西安交通大学第一医院攻读传染病专业博士研究生, 主要从事传染病临床与基础研究工作.
基金项目: 国家自然科学基金攻关项目, No. C03011402, No. C30070689; 军队"九、五"科技攻关项目, No. 98D063; 军队回国留学人员启动基金项目, No. 98H038; 军队"十、五"科技攻关青年基金项目, No. 01Q138; 军队"十、五"科技攻关面上项目, No. 01MB135.
通讯作者: 成军, 100039, 北京市西四环中路100号, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室. cj@genetherapy.com.cn
电话: 010-66933392 传真: 010-63801283
收稿日期: 2003-11-13
修回日期: 2003-12-01
接受日期: 2003-12-16
在线出版日期: 2004-04-15
Abstract

目的: HCV NS5A病毒蛋白反式激活作用的新的靶基因NS5ATP2及其不同剪接体基因序列的确立、克隆化研究.

方法: 依据我室构建的NS5A反式激活基因差异表达的cDNA消减文库, 利用生物信息学技术获得, 提取HepG2细胞的总RNA, 进行反转录(RT-PCR), 扩增产物与原核表达载体连接, 进行测序鉴定.

结果: 经测序鉴定成功获得新基因的编码序列, 并意外发现了NS5ATP2的不同剪接体, 对NS5ATP2基因组进行分析, 获得剪接体的编码序列, 并成功进行了克隆化研究.

结论: 利用分子生物信息学技术, 发现并鉴定了HCV NS5A反式激活作用的新的靶基因NS5ATP2(615)及其可变剪接体NS5ATP2(216), 为研究新基因的生物学功能及丙肝发病机制提供新的依据.

Keywords: N/A