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原代培养大鼠肝细胞的基因转染
何勇, 窦科峰, 陈勇, 中国人民解放军第四军医大学西京医院肝胆外科 陕西省西安市 710032
周峻, 中国人民解放军第四军医大学秦都医院病理科 陕西省西安市 710032
何勇, 男, 1968-09-27生, 辽宁省海城市人, 汉族, 医学博士, 讲师, 主治医师.
基金项目: 国家自然科学基金资助 , No. 30170927, No. 30070210 .
通讯作者: 何勇, 710032, 陕西省西安市长乐西路127号, 中国人民解放军第四军医大学西京医院肝胆外科. heyong007@yahoo.com
电话: 029-83375259 传真: 029-83244986
收稿日期: 2003-03-08
修回日期: 2003-03-25
接受日期: 2003-04-05
在线出版日期: 2004-03-15
修回日期: 2003-03-25
接受日期: 2003-04-05
在线出版日期: 2004-03-15
Abstract
目的: 研究原代培养大鼠肝细胞的基因转染的方法.
方法: 采用胶原酶灌注法获取原代培养大鼠肝细胞. 利用脂质体转染法将含有绿色荧光蛋白(GFP)和Neo基因的真核细胞表达载体(pEGFP-N3)转染原代培养大鼠肝细胞. 用荧光显微镜观察和Neo基因原位杂交染色方法检测肝细胞内基因表达情况.
结果: 获取的原代大鼠肝细胞活细胞率达95%. 荧光显微镜下观察可见转染基因的细胞可发出绿色荧光, 原位杂交显示有Neo基因的表达.
结论: pEGFP-N3基因可转入大鼠肝细胞并获得表达, 可用于标记原代培养的大鼠肝细胞, 有利于研究肝细胞移植后移植的肝细胞在体内的分布及功能.
Keywords: N/A