研究快报
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世界华人消化杂志. 2004-11-15; 12(11): 2731-2733
Published online 2004-11-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i11.2731
肝细胞、胰岛细胞与储脂细胞共培养对肝细胞功能的影响
于聪慧, 林梅, 梅建民, 余昌中, 杨荣华, 姚军波
于聪慧, 林梅, 梅建民, 余昌中, 杨荣华, 姚军波, 北京军区总医院肝胆外科 北京市 100700
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30170421.
通讯作者: 于聪慧, 100700, 北京市东城区朝内北小街2号, 北京军区总医院肝胆外科. ychst@public.fhnet.cn.net
电话: 010-66721896
收稿日期: 2004-08-25
修回日期: 2004-09-01
接受日期: 2004-09-09
在线出版日期: 2004-11-15
Abstract

目的: 探讨肝细胞、胰岛细胞和储脂细胞共培养对肝细胞功能的影响.

方法: 采用改良胶原酶消化法分离获得大鼠肝细胞和储脂细胞, 同时利用梯度离心分离胰岛细胞. 分两组实验, 肝细胞培养组(对照组), 肝细胞用RPMI1640、胰岛素10-7 mol/L、100 mL/L FBS及地塞米松10-8 mol/L配成细胞悬液, 2 mL放入9 cm2培养瓶中连续培养15 d(37 ℃ 50 mL/L CO2). 肝细胞、胰岛细胞和储脂细胞共培养组(实验组): 将1×107 /L的储脂细胞2 mL先加入培养瓶中, 培养条件及培养液同肝细胞培养组, 培养48 h后弃上清后将肝细胞2×108 /L 2 mL和胰岛细胞(100个)分别加入并观察肝细胞存活情况; 全自动生化分析仪测定培养上清液中总蛋白及尿素氮的含量; 两组细胞均在培养10 d行细胞组织学及组织化学检测, 包括肝细胞HE染色、肝细胞内糖原PAS染色及葡萄糖-6-磷酸酶染色检测.

结果: 培养第7 d对照组部分肝细胞脱落, 核固缩, 胞质破碎分解. 而实验组肝细胞粘壁生长好, 肝细胞、储脂细胞和胰岛细胞相间形成团状和索形. 培养10 d对照组肝细胞核完全固缩, 胞质破碎分解, 糖原、葡萄糖-6-磷酸酶的表达消失; 实验组肝细胞呈片状, 胞质饱满, 糖原、葡萄糖-6磷酸酶的表达良好. 培养5 d后实验组白蛋白及尿素氮的合成明显高于对照组(P<0.05).

结论: 肝细胞、胰岛细胞和储脂细胞共培养明显延长肝细胞存活期.

Keywords: N/A