病毒性肝炎
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世界华人消化杂志. 2003-02-15; 11(2): 157-160
Published online 2003-02-15. doi: 10.11569/wcjd.v11.i2.157
IRES特异性IRNA对HCV IRES启动蛋白翻译细胞内抑制作用
梁雪松, 连建奇, 周永兴, 聂青和, 郝春秋
梁雪松, 连建奇, 周永兴, 聂青和, 郝春秋, 中国人民解放军第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心 陕西省西安市 710038
梁雪松, 女, 1970-12-03生, 汉族, 医学博士, 主治医师. 山西省和顺县人.
基金项目: 国家自然科学基金课题, No. 3000147.
通讯作者: 连建奇, 710038, 陕西省西安市新寺街1号, 中国人民解放军第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心. lianjq@yahoo.com
电话: 029-3377595
收稿日期: 2002-10-25
修回日期: 2002-11-01
接受日期: 2002-11-20
在线出版日期: 2003-02-15
Abstract

目的: 研究核糖体内部进入位点(internal ribosome entry site, IRES)特异性抑制性RNA (inhibitor RNA, IRNA)细胞内对丙型肝炎病毒(HCV) IRES介导蛋白翻译的抑制作用.

方法: 体外应用脂质体细胞转染法, 将IRNA及其突变体mIRNA真核表达载体pcRz-IRNA/pcRz-mIRNA转染人肝癌细胞株(HHCC), 经G418筛选4 wk后建立IRNA及mIRNA表达株; 以相同的方法构建pcHCVcluc转染株; 以脂质体介导细胞转染法将pCMVNCRLuc转染IRNA及mIRNA细胞株, 于转染后48 h检测荧光素酶表达量; 将IRNA及mIRNA真核表达体转染pcHCVcLuc表达株, 于转染后不同时间检测荧光素酶表达量.

结果: HCV IRES介导蛋白翻译在IRNA表达株明显受到抑制, 同样IRNA对HCV翻译复制子的蛋白翻译作用有明显抑制性; 突变体mIRNA表达株和空载体对照株中未见相似的抑制性.

结论: pcHCVcluc在HHCC细胞中获得有效表达; IRES特异性IRNA能有效的抑制HCV IRES介导细胞内蛋白翻译作用.

Keywords: N/A