基础研究
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世界华人消化杂志. 2003-11-15; 11(11): 1690-1693
Published online 2003-11-15. doi: 10.11569/wcjd.v11.i11.1690
贮脂细胞Smad4反义基因转移及对细胞外基质合成的抑制作用
徐新保, 冷希圣, 何振平, 梁志清
徐新保, 冷希圣, 北京大学人民医院肝胆外科中心 北京市 100044
徐新保, 男, 1968-11-06生, 河南省延津县人, 汉族, 1989年第三军医大学本科毕业, 1994年第三军医大学硕士研究生毕业, 2000年第三军医大学博士毕业. 现正在北京大学人民医院从事博士后工作. 主要从事肝硬化、门静脉高压症及肝癌的临床和实验研究.
何振平, 中国人民解放军第三军医大学西南肝胆外科医院 重庆市 400038
梁志清, 中国人民解放军第三军医大学西南医院妇产科 重庆市 400038
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 39870832.
通讯作者: 徐新保, 100044, 北京市西直门南大街11号, 北京大学人民医院肝胆外科中心. x_xb@163.net
电话: 010-68792703
收稿日期: 2003-03-29
修回日期: 2003-04-10
接受日期: 2003-04-16
在线出版日期: 2003-11-15
Abstract
目的

探讨通过反义Smad4基因转移阻断TGF-β1的信号传导后对贮脂细胞激活和细胞外基质产生的影响.

方法

将Smad4的基因序列反向插入腺病毒表达质粒pAdv 5SR(+), 构建反义Smad4的表达质粒pAdAT Smad4. 该表达载体再与重组质粒pJM17同源重组, 共转染入293细胞, 通过PCR法筛选、鉴定, 得到含反义Smad4基因的复制缺陷型重组腺病毒AdAT Smad4. 将AdATSmad4扩增纯化, 再转入贮脂细胞株CFSC内, 应用RT-PCR检测反义基因的表达, 用原位杂交和免疫组织化学等方法检测Smad4和细胞外基质的产生.

结果

转基因的CFSC细胞内有反义Smad4表达, 且其合成分泌Smad4和细胞外基质降低.

结论

反义Smad4 RNA可以抑制贮脂细胞的激活和内源性Smad4和细胞外基质的产生, 为抗纤维化基因治疗提供理论依据.

Keywords: N/A