安胃汤抑制CAG大鼠PD-1/PD-L1信号轴免疫逃逸机制研究

文章亮点

实验背景

安胃汤为全国名老中医林沛湘治疗慢性胃炎临床验方, 多年临床经验显示安胃汤治疗慢性萎缩性胃炎疗效显著. 现代药理研究证实安胃汤中的组成药物半夏、黄连及其有效成分均能改善慢性萎缩性胃炎模型动物炎症损伤, 被认为是防治慢性萎缩性胃炎的核心药物. 前期研究发现, 安胃汤通过上调慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis, CAG)模型大鼠胃黏膜Fas、FasL蛋白的表达, 对大鼠胃黏膜细胞Fas/FasL信号传导通路的激活进行调控, 从而起到抗CAG的作用. 当前研究发现, 阻断程序性死亡受体-1(programmed cell death protein 1, PD-1)/程序性死亡受体配体-1(programmed cell death ligand 1, PD-L1)信号通路, 抑制肿瘤细胞免疫逃逸是治疗胃癌的潜在靶点, 尽早使用药物干预治疗有利于实现CAG的逆转, 但安胃汤治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制是否与其调控PD-1/PD-L1信号通路相关, 还有待进一步研究.

实验动机

本实验从免疫逃逸角度出发, 探讨安胃汤治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制, 以期为临床更好地应用该方提供科学依据.

实验目标

本实验通过观察安胃汤对1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(1-Methyl-3-nitro-1-nitrosoguanidine, MNNG)溶液诱导形成的CAG模型大鼠中PD-1/PD-L1信号通路及相关因子的影响, 探究安胃汤治疗CAG的作用机制.

实验方法

本实验构建MNNG诱导的CAG大鼠模型, 并给予不同剂量的安胃汤治疗, 收集血清和胃黏膜组织, 通过HE染色、TUNEL、免疫组化、ELISA、PCR、Western-blot检测评估安胃汤对CAG大鼠胃黏膜细胞形态学、血清中CD4⁺、CD8⁺水平以及胃黏膜组织中PD-1/PD-L1信号通路相关基因、蛋白表达水平的影响.

实验结果

安胃汤能降低CAG模型大鼠血清中CD8⁺表达及胃组织中PD-1、PD-L1基因和蛋白水平, 升高大鼠血清中CD4⁺的表达, 升高CD4⁺/CD8⁺的比值水平.

实验结论

安胃汤可能通过清除异变的CD8⁺T细胞, 增强机体免疫应答和T细胞杀伤作用, 继而降低PD-1、PD-L1表达, 阻断因PD-1、PD-L1结合导致的T细胞耗竭, 从而改善CAG大鼠症状, 发挥治疗作用.

展望前景

本研究为安胃汤的临床应用提供了一定的实验依据. 但由于胃黏膜癌变过程错综复杂、变化多端, 且中药复方的治疗作用存在多靶点、多层次、多水平的特点, 因此需要深入研究以进一步明确安胃汤做为中药复方发挥治疗作用的作用机制.