基础研究
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世界华人消化杂志. 2024-04-28; 32(4): 302-312
Published online 2024-04-28. doi: 10.11569/wcjd.v32.i4.302
长链非编码RNA LINC00996通过抑制CDKN2A促进胃癌进展
程国雄, 刘明, 陈正伟, 叶巧萍
程国雄, 刘明, 陈正伟, 叶巧萍, 丽水市人民医院胃肠外科 浙江省丽水市 323000
程国雄, 本科, 副主任医师, 研究方向为胃肠道肿瘤外科综合治疗的临床和基础研究.
基金项目: 丽水市科技计划项目, No. 2020SJZC037.
作者贡献分布: 此课题由程国雄及刘明设计; 临床标本的获取由程国雄及陈正伟完成; 体外细胞实验和分子生物学实验由程国雄、陈正伟及叶巧萍完成; 统计学分析由叶巧萍完成; 本论文的写作由程国雄、叶巧萍及刘明完成.
通讯作者: 程国雄, 本科, 副主任医师, 323000, 浙江省丽水市丽阳街1188号, 丽水市人民医院胃肠外科. jiemengqn52403@163.com
收稿日期: 2024-03-05
修回日期: 2024-04-07
接受日期: 2024-04-15
在线出版日期: 2024-04-28
Abstract
背景

长链非编码RNA长基因间非蛋白编码RNA 996(long intergenic non-protein coding RNA 996, LINC00996)在多种肿瘤中发挥促癌或抑癌作用, 而其在胃癌中的表达和作用尚不清楚.

目的

探索LINC00996在胃癌组织和细胞系中的表达, 并探讨其对胃癌细胞生物学行为的作用及机制.

方法

用生物信息学法分析胃癌中LINC00996的表达, 及其对胃癌患者总生存期的影响. 用RT-qPCR检测胃癌及癌旁组织、胃癌及正常胃上皮细胞系中LINC00996表达. 胃癌细胞(SGC7901、NCI-N87)转染针对LINC00996的小干扰RNA(si-LINC00996)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白2A(cyclin-dependent kinase inhibitor 2A, CDKN2A)的小干扰RNA(si-CDKN2A)后, 用细胞计数试剂盒-8法、EDU染色法、流式细胞术法、划痕法和Transwell法分别检测细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移与侵袭; Western blot法检测细胞中CDKN2A、周期蛋白D1、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2, Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax)和劈开的半胱胺酸蛋白酶-3(Cleaved cysteinyl aspartate-specific proteinase-3, Cleaved caspase-3)表达.

结果

LINC00996在胃癌组织和细胞中表达较癌旁组织和胃正常细胞系显著升高(P<0.05), Kaplan Meier Plotter数据库显示LINC00996高表达组的胃癌患者的总生存期较低表达组显著缩短(P<0.05). 敲降LINC00996能抑制胃癌细胞增殖、细胞周期运行、迁移、侵袭(P<0.05), 促进细胞凋亡(P<0.05); 降低cyclin D1和Bcl-2表达(P<0.05); 升高CDKN2A、Bax和Cleaved caspase-3表达(P<0.05). 敲降CDKN2A能部分逆转敲降LINC00996对胃癌细胞的作用(P<0.05).

结论

敲降LINC00996能通过上调CDKN2A诱导胃癌细胞凋亡, 抑制其增殖、迁移与侵袭.

Keywords: 长基因间非蛋白编码RNA 996; 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白2A; 胃癌; 增殖; 凋亡; 迁移; 侵袭

核心提要: 长基因间非蛋白编码RNA 996在胃癌中发挥促癌作用, 敲降其表达能抑制胃癌细胞增殖、迁移与侵袭并促进凋亡; 其发挥功能可能与调节细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白2A表达有关.