临床研究
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世界华人消化杂志. 2021-09-08; 29(17): 990-998
Published online 2021-09-08. doi: 10.11569/wcjd.v29.i17.990
lncRNA CCDC183-AS1通过靶向miR-1301-3p调控胃癌AGS细胞的增殖、迁移和侵袭
张红英, 何陈聪, 钟定福
张红英, 何陈聪, 钟定福, 金华市人民医院消化内科 浙江省金华市 321000
张红英, 研究生学历, 主要从事胃肠道疾病研究.
作者贡献分布: 张红英与钟定福对此文所作贡献两均等; 此课题由张红英, 何陈聪, 钟定福设计; 研究过程由张红英, 何陈聪, 钟定福操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由何陈聪提供; 数据分析由张红英, 何陈聪, 钟定福完成; 本论文写作由张红英完成.
通讯作者: 钟定福, 本科, 主治医师, 321000, 浙江省金华市金东区丹溪东路267号, 金华市人民医院消化内科. 1772143482@qq.com
收稿日期: 2021-04-22
修回日期: 2021-05-20
接受日期: 2021-06-28
在线出版日期: 2021-09-08
Abstract
背景

长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA) CCDC183-AS1在肝细胞癌中表达上调, 促进肝细胞癌进展. 但lncRNA CCDC183-AS1对胃癌的影响及其分子机制还未知. StarBase预测显示, lncRNA CCDC183-AS1可能靶向结合miR-1301-3p. 本研究假设lncRNA CCDC183-AS1可靶向调控miR-1301-3p影响胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭, 进而影响胃癌发展进程.

目的

探讨lncRNA CCDC183-AS1对胃癌AGS细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及其分子机制.

方法

选取本院30例胃癌组织及匹配的癌旁组织;实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR, RT-qPCR)检测lncRNA CCDC183-AS1和miR-1301-3p表达及变化; 四甲基偶氮唑盐比色法(methyl thiazolye telrazlium, MTT)检测细胞增殖, Transwell检测细胞迁移侵袭, 蛋白质印迹(Western blot)检测细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2, MMP-2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9, MMP-9)和p21蛋白的表达; AGS细胞中分别转染si-CCDC183-AS1、miR-1301-3p, 并利用上述检测细胞增殖、迁移侵袭能力的变化; StarBase预测显示lncRNA CCDC183-AS1的序列中含有与miR-1301-3p互补的核苷酸序列, 双荧光素酶报告实验鉴定其靶向关系.

结果

与癌旁组织比较, 胃癌组织中lncRNA CCDC183-AS1和miR-1301-3p的表达水平分别显著升高和降低(P<0.05). 抑制lncRNA CCDC183-AS1表达或过表达miR-1301-3p后, AGS细胞的增殖和迁移侵袭能力下降, CyclinD1、MMP-2和MMP-9表达水平降低, p21表达水平升高(P<0.05). lncRNA CCDC183-AS1靶向调控miR-1301-3p表达(P<0.05). 下调miR-1301-3p表达逆转了抑制lncRNA CCDC183-AS1表达对胃癌AGS细胞增殖、迁移和侵袭的影响.

结论

抑制lncRNA CCDC183-AS1通过靶向上调miR-1301-3p表达调控胃癌AGS细胞的增殖、迁移和侵袭.

Keywords: lncRNA CCDC183-AS1; miR-1301-3p; 胃癌; 增殖; 迁移; 侵袭

核心提要: 长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA) CCDC183-AS1在胃癌中高表达,而miR-1301-3p低表达, 双荧光素酶报告实验证实lncRNA CCDC183-AS1可靶向miR-1301-3p, 下调lncRNA CCDC183-AS1可靶向负调控miR-1301-3p表达抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭.