基础研究
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世界华人消化杂志. 2013-08-08; 21(22): 2136-2142
Published online 2013-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v21.i22.2136
PTD-NBD多肽对大鼠胰腺腺泡细胞炎症损伤中NF-κB表达的影响
谢文瑞, 杨元生, 杨新魁, 陈垦, 陈婧华, 崔淑兰, 王晖
谢文瑞, 广东药学院附属第一医院消化内科 广东省广州市 510080
杨元生, 广东药学院附属第二医院/新海医院消化内科 广东省广州市 510300
杨新魁, 广东医学院附属陈星海医院消化内科 广东省中山市 528415
陈垦, 陈婧华, 广东药学院护理医学院 广东省广州市 510310
崔淑兰, 广东药学院附属门诊部 广东省广州市 510224
王晖, 广东药学院中药学院药理学教研室 广东省广州市 510006
谢文瑞, 主治医师, 主要从事急性胰腺炎的治疗与发病机制的研究.
基金项目: 广东省科技计划基金资助项目, No. 2007A060305007, No. 2007B031405004, No. 2012B060300029; 广东省医学科研基金资助项目, No. B2012187; 广东省中山市科技计划基金资助项目, No. 20102A124.
作者贡献分布: 本论文由杨新魁与陈垦设计; 谢文瑞、杨元生及陈婧华完成实验; 数据统计分析与撰写论文; 崔淑兰与王晖负责审校.
通讯作者: 杨新魁, 教授, 主任医师, 528415, 广东省中山市高塘一街1号, 广东医学院附属陈星海医院消化内科. cxhyy-hospital@163.com
电话: 0756-22287609
收稿日期: 2013-05-11
修回日期: 2013-06-02
接受日期: 2013-07-03
在线出版日期: 2013-08-08
Abstract

目的: 探讨PTD-NBD多肽对体外大鼠胰腺腺泡细胞核因子-κB(nuclear factor κB, NF-κB) p65的表达影响.

方法: 分离培养大鼠胰腺腺泡细胞, 分为正常对照组、急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)组和PTD-NBD多肽组, 用脂多糖(10 mg/L)诱导体外细胞AP模型, 分别于建模6和12 h观察细胞形态学变化, 培养液中淀粉酶(amylase, AMY)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和白介素(interleukin, IL)-1β含量, RT-PCR和免疫印迹法检测细胞中NF-κB p65 RNA及其蛋白表达.

结果: 与对照组相比, AP组各时间点腺泡细胞发生肿胀和死亡增多(细胞形态学评分: 6 h: 8.90±0.34 vs 1.10±0.13; 12 h: 9.40±0.26 vs 1.20±0.15, P<0.05), 培养液中AMY升高(6 h: 2135.8±347.2 vs 873.5±91.6; 12 h: 3299.6±217.7 vs 917.7±101.9, P<0.05), IL-1β含量升高(6 h: 84.9±15.7 vs 39.3±7.9; 12 h: 95.6±17.1 vs 38.9±5.2, P<0.05), SOD含量降低(6 h: 116.3±30.3 vs 176.2±21.6; 12 h: 101.5±25.6 vs 173.6±27.9, P<0.05), 细胞中NF-κB p65 RNA及其蛋白表达量增多(P<0.05); 与AP组比较, 经PAT-NBD多肽预处理后腺泡细胞出现肿胀和死亡减少(细胞形态学评分: 6 h: 6.80±0.23 vs 8.90±0.34; 12 h: 7.50±0.19 vs 9.40±0.26, P<0.05), 培养液中SOD上升(6 h: 137.6±27.4 vs 116.3±30.3; 12 h: 144.3±23.6 vs 101.5±25.6, P<0.05), AMY下降(6 h: 1951.5±211.7 vs 2135.8±347.2; 12 h: 1761.3±231.5 vs 3299.6±217.7, P<0.05), IL-1β含量明显下降(6 h: 66.8±11.6 vs 84.9±15.7; 12 h: 54.8±21.2 vs 95.6±17.1, P<0.05), NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.05).

结论: PTD-NBD多肽透过大鼠胰腺腺泡细胞膜抑制脂多糖刺激的NF-κB p65活化及其活性, 下调IL-1β表达, 上调SOD含量, 从而减轻胰腺腺泡细胞的炎症损伤.

Keywords: 急性胰腺炎; 胰腺腺泡细胞; 核因子-κB; NBD多肽

核心提示: 核因子-κB(nuclear factor-κB, NF-κB)参与胰腺腺泡细胞炎症损伤是急性胰腺炎(acute pancreatitis)的早期事件, PTD-NBD多肽可有效透过大鼠胰腺腺泡细胞膜, 并与细胞中NF-κB活化通路上游IκB激酶抑制物(inhibition of IκB kinase)复合物中NBD区域结合, 减少下游炎症介质的生成和释放, 减轻胰腺腺泡细胞炎症损伤.