基础研究
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世界华人消化杂志. 2008-06-18; 16(17): 1837-1841
Published online 2008-06-18. doi: 10.11569/wcjd.v16.i17.1837
5-Aza-dC和TSA对胃癌细胞系p16和hMLH-1基因甲基化水平及表达的影响
朱新江, 孟春风, 彭过, 戴冬秋
朱新江, 孟春风, 彭过, 戴冬秋, 中国医科大学附属第一医院肿瘤外科、普通外科教研室、胃肠肿瘤外科 辽宁省沈阳市 110001
朱新江, 中国医科大学硕士在读, 主要从事胃肠癌转移的分子学机制的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30572162, No. 30271477; 教育部高校博士点基金资助项目, No. 20050159001.
作者贡献分布: 朱新江、孟春风及彭过对此文所作贡献均等; 此课题由戴冬秋设计; 研究过程由朱新江、孟春风及彭过操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由戴冬秋及孟春风提供; 数据分析及论文写作由朱新江完成.
通讯作者: 戴冬秋, 110001, 沈阳市和平区南京北街155号, 中国医科大学附属第一医院肿瘤科, 辽宁省胃癌分子病理重点实验室. daidq63@163.com
收稿日期: 2007-12-21
修回日期: 2008-04-06
接受日期: 2008-05-15
在线出版日期: 2008-06-18
Abstract

目的: 探讨5-Aza-dC及TSA对胃癌细胞系中抑癌基因p16和hMLH-1基因甲基化水平和基因表达的影响.

方法: 5-Aza-dC及TSA处理体外培养的MKN-45细胞和MGC-803细胞, 应用逆转录PCR(RT-PCR)法及甲基化特异性PCR(MSP)法分别检测两株细胞药物干预前后抑癌基因p16和hMLH-1的表达及甲基化情况.

结果: MKN-45和MGC-803细胞系经TSA, 5-Aza-dC及联合作用后使原来不表达或有弱表达的抑癌基因p16和hMLH-1重新表达或表达增强. 胃癌细胞系MKN-45和MGC-803均显示p16、hMLH-1基因启动子区存在高甲基化, 其中p16基因在两种胃癌细胞系中均表现为甲基化, hMLH-1基因在胃癌细胞系MGC-803中表现为甲基化而在胃癌细胞系MKN-45中表现为半甲基化. 在5-Aza-dC及TSA的作用下, MKN-45和MGC-803细胞系中p16及hMLH-1基因的甲基化状态得到逆转.

结论: 胃癌细胞系中抑癌基因p16和hMLH-1基因启动子甲基化可能是导致其基因失活的主要原因, 5-Aza-dC单独作用和5-Aza-dC及TSA联合应用效果相似, 均能显著增强甲基化的肿瘤抑制基因的重新表达.

Keywords: 胃癌; DNA甲基化; 5-氮杂-2'-脱氧胞苷; Trichostatin A; p16基因; hMLH-1基因