肝癌
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世界华人消化杂志. 2004-09-15; 12(9): 2061-2065
Published online 2004-09-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i9.2061
HAb18Gedomab1单抗的制备及功能研究
叶卉, 陈志南, 米力, 商澎, 骞爱荣, 蒋建利, 汪莉, 谢丽, 张敏
叶卉, 陈志南, 米力, 商澎, 骞爱荣, 蒋建利, 汪莉, 谢丽, 张敏, 中国人民解放军第四军医大学细胞工程研究中心 陕西省西安市 710032
叶卉, 女, 1977-09-08生, 陕西省米脂县人, 汉族. 第四军医大学细胞工程研究中心2002级硕士研究生. 主要从事肿瘤细胞生物学和肿瘤药物学研究.
通讯作者: 陈志南, 710032, 陕西省西安市长乐西路169 号, 中国人民解放军第四军医大学细胞工程研究中心. chcerc2@fmmu.edu.cn
电话: 029-83374547 传真: 029-83293906
收稿日期: 2004-07-06
修回日期: 2004-07-09
接受日期: 2004-07-11
在线出版日期: 2004-09-15
Abstract

目的: 制备抗人HAb18G/CD147胞外区蛋白(HAb18Ged)的单抗HAb18Gedomab1, 并对其理化性质和生物学功能进行分析鉴定.

方法: 以HAb18Ged免疫Balb/c小鼠, 通过杂交瘤技术, 融合并筛选分泌抗人HAb18Ged蛋白单抗的杂交瘤细胞株, 制备腹水, 采用离子交换层析法纯化该抗体. 采用流式细胞术、免疫组化等方法对其特异性进行鉴定, 并通过明胶酶谱、I型胶原酶谱、重组基底膜降解实验研究该抗体的体外生物学功能.

结果: 获得一株稳定分泌抗人HAb18G/CD147胞外区蛋白单抗的杂交瘤细胞株HAb18Gedomab1, 滴度为: 1:106, 纯化后HAb18Gedomab1单抗的纯度大于90%, 抗体亚型属IgG1型. 流式细胞术及免疫组化结果证明, 该抗体与FHCC-98细胞膜抗原及肝癌组织均呈特异性结合. 生物学功能研究表明, HAb18Gedomab1可刺激鼠成纤维细胞(3T3)分泌明胶酶MMP-2, MMP-9及胶原酶MMP-1, MMP-8, 并具有促进基底膜降解的作用.

结论: HAb18Gedomab1单抗可特异识别HAb18Ged, 刺激MMPs分泌, 促进基底膜降解.

Keywords: N/A