麦冬皂苷D通过调控miR-519d-3p/EIF4E表达对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的实验研究

doi:10.11569/wcjd.v27.i24.1473

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2019-12-28 (publication date) through 2024-04-26

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本文章的期刊信息

出版物名称

世界华人消化杂志

ISSN

1009-3079

本文章的出版商

Baishideng Publishing Group Inc, 7041 Koll Center Parkway, Suite 160, Pleasanton, CA 94566, USA

基础研究

世界华人消化杂志. 2019-12-28; 27(24): 1473-1482
在线出版 2019-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v27.i24.1473

表1 OPD对HepG2细胞增殖、迁移和侵袭的影响(mean±SD, n = 12)

分组	抑制率(%)	迁移细胞数(个)	侵袭细胞数(个)	CyclinD1蛋白	p21蛋白	MMP-2蛋白	MMP-9蛋白
对照组	0.00±0.00	126.34±10.48	109.23±9.24	0.73±0.07	0.24±0.03	0.77±0.06	0.75±0.07
OPD 2.5 μmol/L组	17.28±1.75^a	92.41±9.14^a	81.42±8.01^a	0.61±0.06^a	0.39±0.04^a	0.64±0.05^a	0.59±0.05^a
OPD 5 μmol/L组	39.46±3.57^a^c	71.26±7.24^a^c	59.37±5.44^a^c	0.48±0.05^a^c	0.52±0.05^a^c	0.52±0.04^a^c	0.48±0.04^a^c
OPD 10 μmol/L组	61.14±6.28^a^c^e	53.41±5.22^a^c^e	41.69±4.83^a^c^e	0.27±0.03^a^c^e	0.68±0.06^a^c^e	0.37±0.03^a^c^e	0.32±0.03^a^c^e
P值	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000

与对照组比较,

^aP<0.05; 与OPD 2.5 μmol/L组比较,

^cP<0.05; 与OPD 5 μmol/L组比较,

^eP<0.05. OPD: 麦冬皂苷D; CyclinD1: 细胞周期蛋白D1; MMP: 基质金属蛋白酶.

表2 OPD对MHCC97细胞增殖、迁移侵袭的影响(mean±SD, n = 12)

分组	抑制率(%)	迁移细胞数(个)	侵袭细胞数(个)	CyclinD1蛋白	p21蛋白	MMP-2蛋白	MMP-9蛋白
对照组	0.00±0.01	105.32±11.22	89.65±8.33	0.68±0.06	0.29±0.03	0.65±0.06	0.78±0.07
OPD 2.5 μmol/L组	19.65±1.84^a	81.65±8.43^a	71.61±7.42^a	0.56±0.05^a	0.44±0.04^a	0.54±0.05^a	0.65±0.05^a
OPD 5 μmol/L组	31.26±3.45^a^c	62.98±6.33^a^c	56.44±5.31^a^c	0.44±0.04^a^c	0.58±0.05^a^c	0.41±0.04^a^c	0.53±0.05^a^c
OPD 10 μmol/L组	48.61±4.33^a^c^e	42.87±4.39^a^c^e	34.29±4.63^a^c^e	0.29±0.03^a^c^e	0.73±0.07^a^c^e	0.26±0.03^a^c^e	0.34±0.03^a^c^e
P值	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000

与对照组比较,

^aP<0.05; 与OPD 2.5 μmol/L组比较,

^cP<0.05; 与OPD 5 μmol/L组比较,

^eP<0.05. OPD: 麦冬皂苷D; CyclinD1: 细胞周期蛋白D1; MMP: 基质金属蛋白酶.

表3 OPD对HCC细胞中miR-519d-3p和EIF4E表达的影响(mean±SD, n = 12)

分组	HepG2			MHCC97
分组	miR-519d-3p	EIF4E mRNA	EIF4E蛋白	miR-519d-3p	EIF4E mRNA	EIF4E蛋白
对照组	1.00±0.09	1.02±0.09	0.62±0.06	1.00±0.08	1.01±0.07	0.57±0.05
OPD 2.5 μmol/L组	2.11±0.21^a	0.81±0.08^a	0.49±0.04^a	1.62±0.16^a	0.87±0.07^a	0.46±0.04^a
OPD 5 μmol/L组	3.02±0.29^a^c	0.63±0.06^a^c	0.33±0.03^a^c	2.51±0.22^a^c	0.75±0.06^a^c	0.35±0.03^a^c
OPD 10 μmol/L组	4.27±0.38^ace	0.42±0.04^ace	0.21±0.03^ace	3.12±0.31^ace	0.57±0.05^ace	0.24±0.03^ace
P值	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000

与对照组比较,

^aP<0.05; 与OPD 2.5 μmol/L组比较, ^bP<0.05; 与OPD 5 μmol/L组比较,

^cP<0.05. OPD: 麦冬皂苷D; EIF4E: 真核细胞翻译起始因子4E.

表4 双荧光素酶报告实验(mean±SD, n = 6)

分组	HepG2		MHCC97
分组	WT-EIF4E	MUT-EIF4E	WT-EIF4E	MUT-EIF4E
miR-NC	1.02±0.09	0.98±0.08	1.00±0.08	1.04±0.09
miR-519d-3p	0.35±0.03^a	0.99±0.09	0.47±0.04^a	1.02±0.07
P值	0.000	0.843	0.000	0.677

与miR-NC组比较,

^aP<0.05. WT-EIF4E: 真核细胞翻译起始因子4E野生型荧光素酶载体; MUT-EIF4E: 真核细胞翻译起始因子4E突变型荧光素酶载体.

表5 miR-519d-3p调控EIF4E蛋白表达(mean±SD, n = 12)

分组	EIF4E蛋白
分组	HepG2	MHCC97
miR-NC	0.63±0.06	0.55±0.05
miR-519d-3p	0.23±0.03^a	0.19±0.02^a
anti-miR-NC	0.60±0.06	0.53±0.04
anti-miR-519d-3p	0.96±0.09^c	0.85±0.07^c
P值	0.000	0.000

与miR-NC组比较,

^aP<0.05; 与anti-miR-NC组比较,

^cP<0.05. EIF4E: 真核细胞翻译起始因子4E.

表6 miR-519d-3p过表达对HepG2细胞增殖、迁移和侵袭的影响(mean±SD, n = 6)

分组	miR-519d-3p	抑制率(%)	迁移细胞数(个)	侵袭细胞数(个)	CyclinD1蛋白	p21蛋白	MMP-2蛋白	MMP-9蛋白
miR-NC	1.01±0.09	5.18±0.53	115.69±10.27	98.17±9.36	0.71±0.07	0.22±0.03	0.75±0.07	0.72±0.07
miR-519d-3p	3.92±0.38^a	48.32±4.18^a	56.98±5.52^a	41.28±4.58^a	0.34±0.03^a	0.62±0.06^a	0.41±0.04^a	0.39±0.03^a
P值	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000

与miR-NC组比较,

^aP<0.05. CyclinD1: 细胞周期蛋白D1; MMP: 基质金属蛋白酶.

表7 miR-519d-3p过表达对MHCC97细胞增殖、迁移和侵袭的影响(mean±SD, n = 6)

分组	miR-519d-3p	抑制率(%)	迁移细胞数(个)	侵袭细胞数(个)	CyclinD1蛋白	p21蛋白	MMP-2蛋白	MMP-9蛋白
miR-NC	1.00±0.08	6.32±0.63	108.32±10.58	86.32±8.41	0.67±0.07	0.28±0.03	0.64±0.07	0.79±0.07
miR-519d-3p	2.86±0.27^a	39.54±3.88^a	52.63±5.66^a	45.18±4.91^a	0.34±0.03^a	0.71±0.07^a	0.28±0.03^a	0.36±0.03^a
P值	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000

与miR-NC组比较,

^aP<0.05. CyclinD1: 细胞周期蛋白D1; MMP: 基质金属蛋白酶.

表8 抑制EIF4E表达对HepG2细胞增殖、迁移和侵袭的影响(mean±SD, n = 6)

分组	EIFE蛋白	抑制率(%)	迁移细胞数(个)	侵袭细胞数(个)	CyclinD1蛋白	p21蛋白	MMP-2蛋白	MMP-9蛋白
si-NC	0.62±0.06	6.24±0.63	118.65±10.27	101.25±8.64	0.73±0.07	0.25±0.03	0.74±0.06	0.71±0.07
si-EIF4E	0.23±0.03^a	46.27±4.21^a	59.41±5.25^a	48.22±4.58^a	0.38±0.04^a	0.59±0.05^a	0.43±0.04^a	0.38±0.04^a
P值	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000

与si-NC组比较,

^aP<0.05. EIF4E: 真核细胞翻译起始因子4E; CyclinD1: 细胞周期蛋白D1; MMP: 基质金属蛋白酶.

表9 抑制EIF4E表达对MHCC97细胞增殖、迁移和侵袭的影响(mean±SD, n = 6)

分组	EIFE蛋白	抑制率(%)	迁移细胞数(个)	侵袭细胞数(个)	CyclinD1蛋白	p21蛋白	MMP-2蛋白	MMP-9蛋白
si-NC	0.55±0.05	5.98±0.57	101.58±10.32	88.14±8.81	0.69±0.06	0.27±0.03	0.63±0.06	0.77±0.07
si-EIF4E	0.21±0.02^a	32.14±3.58^a	56.14±5.31^a	49.36±4.27^a	0.35±0.03^a	0.68±0.06^a	0.31±0.03^a	0.39±0.04^a
P值	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000

与si-NC组比较,

^aP<0.05. EIF4E: 真核细胞翻译起始因子4E; CyclinD1: 细胞周期蛋白D1; MMP: 基质金属蛋白酶.

表10 抑制miR-519d-3p表达逆转了OPD对HCCHepG2细胞增殖、迁移和侵袭的作用(mean±SD, n = 12)

分组	miR-519d-3p	EIF4E蛋白	抑制率(%)	迁移细胞数(个)	侵袭细胞数(个)	CyclinD1蛋白	p21蛋白	MMP-2蛋白	MMP-9蛋白
对照组	1.00±0.08	0.64±0.06	0.00±0.00	116.37±10.54	103.65±9.14	0.74±0.07	0.23±0.03	0.76±0.06	0.73±0.06
OPD组	4.02±0.39^a	0.25±0.03^a	58.14±5.22^a	52.41±5.28^a	43.66±4.28	0.29±0.03^a	0.66±0.06^a	0.35±0.03^a	0.31±0.03^a
OPD+anti-miR-NC	4.11±0.41	0.22±0.03	60.35±6.17	50.29±5.27	41.58±4.27	0.25±0.03	0.69±0.07	0.33±0.03	0.28±0.03
OPD+anti-miR-519d-3p	1.96±0.19^c	0.51±0.05^c	19.68±1.92^c	82.62±8.04^c	71.36±7.24^c	0.61±0.06^c	0.37±0.04^c	0.59±0.05^c	0.56±0.05^c
P值	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000

与对照组比较,

^aP<0.05; 与OPD+anti-miR-NC组比较,

^cP<0.05. OPD: 麦冬皂苷D; EIF4E: 真核细胞翻译起始因子4E; CyclinD1: 细胞周期蛋白D1; MMP: 基质金属蛋白酶.

表11 抑制miR-519d-3p表达逆转了OPD对HCCMHCC97细胞增殖、迁移侵袭的作用(mean±SD, n = 12)

分组	miR-519d-3p	EIF4E蛋白	抑制率(%)	迁移细胞数(个)	侵袭细胞数(个)	CyclinD1蛋白	p21蛋白	MMP-2蛋白	MMP-9蛋白
对照组	1.01±0.09	0.57±0.05	0.00±0.01	109.32±9.47	89.32±8.47	0.66±0.06	0.30±0.03	0.64±0.06	0.79±0.07
OPD组	2.79±0.28^a	0.21±0.01^a	41.65±4.22^a	46.35±4.47^a	36.29±3.58	0.27±0.03^a	0.75±0.07^a	0.25±0.03^a	0.35±0.03^a
OPD+anti-miR-NC	2.84±0.27	0.20±0.03	43.18±4.27	44.25±4.42	34.17±3.44	0.26±0.03	0.76±0.07	0.24±0.03	0.33±0.03
OPD+anti-miR-519d-3p	1.53±0.15^c	0.46±0.04^c	15.98±1.89^c	79.28±7.36^c	68.21±6.22^c	0.54±0.05^c	0.39±0.04^c	0.52±0.05^c	0.68±0.06^c
P值	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000	0.000

与对照组比较,

^aP<0.05; 与OPD+anti-miR-NC组比较, ^bP<0.05. OPD: 麦冬皂苷D; EIF4E: 真核细胞翻译起始因子4E; CyclinD1: 细胞周期蛋白D1; MMP: 基质金属蛋白酶.

引文著录: 申鹏, 汪正飞. 麦冬皂苷D通过调控miR-519d-3p/EIF4E表达对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的实验研究. 世界华人消化杂志 2019; 27(24): 1473-1482