维医异常胆液质载体UC病证大鼠模型的建立以及结肠组织中炎症相关因子iNOS、eNOS的变化

表1 结肠黏膜肉眼与镜下判定评分标准

分值	肉眼观察结肠黏膜损伤程度	镜下组织病理学观察1
		上皮细胞	炎细胞	黏膜
0	肠壁无损伤	形态正常	没有炎细胞浸润
1	肠壁轻度充血、水肿, 表面光滑, 无糜烂或溃疡	有杯状细胞丢失	炎细胞浸润至黏膜基底层	黏膜正常或基本正常, 形成肉芽组织伴纤维化
2	肠壁充血水肿, 黏膜粗糙呈颗粒感, 有糜烂或肠黏连	杯状细胞大面积丢失	炎细胞浸润至黏膜肌层, 有大量慢性炎性细胞浸润	上皮覆盖不全
3	肠壁黏膜充血水肿, 表面有坏死及溃疡形成, 大纵径<1 cm, 肠壁增厚或表面有坏死及炎症	杯、柱状细胞丢失	浸润深入到黏膜下层, 有大量中性粒细胞浸润	有溃疡形成, 伴随黏膜增厚和明显水肿
4	肠壁高度充血水肿, 黏膜坏死及溃疡形成, 溃疡最大纵径≥1 cm, 或全壁结肠坏死、中毒性巨结肠导致死亡; 病变范围每增加1 cm, 计分加1分	杯、柱状细胞大面积丢失	浸润到达黏膜下层

¹每只大鼠镜下观察总评分 = 上皮细胞评分+炎细胞浸润+黏膜评分.

表2 qRT-PCR引物列表(针对mRNA)

基因	引物序列	扩增产物长度(bp)	退火温度(℃)
iNOS	上游: CCACATCTGGCAGGATGAGAA	416	63.5
	下游: AGGCACAGAACTGAGGGTACA
eNOS	上游: ATGTTTGTCTGCGGTGAT	142	60
	下游: CCTCGTGGTAGCGTTG
β-actin	上游: AGCCATGTACGTAGCCATCC	115	57
	下游: ACCCTCATAGATGGGCACAG

qRT-PCR: 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应; iNOS: 诱导型一氧化氮合酶; eNOS: 内皮型一氧化氮合酶.

表3 qRT-PCR引物列表(针对hnRNA)

基因	引物序列	扩增产物长(bp)	退火温度(℃)
iNOS	上游: AGCTGAGTTCCTAACGGAACCCCTC	211	57
	下游: TGGAGCACGCTGAACACC
eNOS	上游: TCTTTCGGAAGGCGTTTG	142	57
	下游: TGAGACAGGGTCCTATGC

qRT-PCR: 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应; iNOS: 诱导型一氧化氮合酶; eNOS: 内皮型一氧化氮合酶.

表4 异常胆液质载体UC病证模型组与正常组一般状态的比较

	异常胆液质载体UC病证模型组	正常组
舌象舌苔	舌苔黄, 干	淡红舌, 薄白苔
皮肤毛发	毛色白, 光泽较暗淡	毛色白, 有光泽
兴奋程度	对刺激敏感强	对刺激敏感
尿色性质	黄色或深黄色	浅黄色
大便状态	成形, 颗粒状, 略硬, 干	成形, 颗粒状, 略软

UC: 溃疡性结肠炎.

表5 正常组与异常胆液质载体UC病证组大鼠异常胆液质证建立前后体质量比较(mean±SD)

分组	第1天	第11天	体质量差异	体质量增长率
正常组	245.80±19.31	284.96±39.45	39.16±17.81	1.25±1.18
异常胆液质载体UC病证组	242.48±25.02	234.45±15.18a	-8.03±18.76a	-3.39±7.89a

^aP<0.05 vs 正常组. UC: 溃疡性结肠炎.

表6 正常组和异常胆液质载体UC病证模型组大鼠结肠肉眼评分等级

分组	评分等级							统计学意义
	0级	1级	2级	3级	4级	5级	6级	Z值	P值
正常组	6	0	0	0	0	0	0	-3.207	0.001a
异常胆液质载体UC病证组	0	0	0	0	0	5	1

^aP<0.05 vs 正常组. UC: 溃疡性结肠炎.

表7 正常组和异常胆液质载体UC病证模型组大鼠结肠组织病理学评分分级

分组	评分等级									统计学意义
	0级	1级	2级	3级	4级	5级	6级	7级	8级	Z值	P值
正常组	6	0	0	0	0	0	0	0	0	-3.083	0.002a
异常胆液质载体UC病证模型组	0	0	0	0	1	1	2	1	1

^aP<0.05 vs 正常组. UC: 溃疡性结肠炎.

表8 正常组和异常胆液质载体UC病证模型组总RNA浓度、纯度及相关参数表

分组	浓度(μg/μL)	A260/A280
正常组
1	1.082	1.96
2	0.545	1.94
3	0.741	1.96
4	0.535	1.94
5	1.341	1.99
6	1.608	1.99
异常胆液质载体UC病证模型组
1	1.203	1.99
2	0.564	1.95
3	0.723	1.96
4	1.816	1.91
5	1.311	1.94
6	0.995	1.95

表9 正常组与异常胆液质载体UC病证模型组结肠组织2个基因的hnRNA表达差异 (mean±SD)

分组	iNOS	eNOS
正常组	1.34±0.34	0.69±0.19
异常胆液质载体UC病证模型组	4.81±1.98a	0.52±0.08

^aP<0.05 vs 正常组. UC: 溃疡性结肠炎; iNOS: 诱导型一氧化氮合酶; eNOS: 内皮型一氧化氮合酶.