晚期糖基化终产物受体特异性小干扰RNA对MMP-1和TIMP-1表达的影响

doi:10.11569/wcjd.v23.i19.3012

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出版物名称

世界华人消化杂志

ISSN

1009-3079

本文章的出版商

Baishideng Publishing Group Inc, 7041 Koll Center Parkway, Suite 160, Pleasanton, CA 94566, USA

基础研究

世界华人消化杂志. 2015-07-08; 23(19): 3012-3021
在线出版 2015-07-08. doi: 10.11569/wcjd.v23.i19.3012

表1 PCR引物序列

引物	引物序列	扩增长度(bp)
RAGE	F: 5'-CCTCTGATTCCTGATGGCAA-3'	158
	R: 5'-CTCCTACTCATGCCCTACCT-3'
MMP-1	F: 5'-TTCAGCCAGGCCCAGGTA-3'	100
	R: 5'-TGAGCAGCCACACGATACAAGT-3'
TIMP-1	F: 5'-GAGAAGGGCTACCAGAGCGA-3'	82
	R: 5'-TCGAGACCCCAAGGTATTGC-3'
GAPDH	F: 5'-GATGCTGGTGCTGAGTATGRCG-3'	200
	R: 5'-GTGGTGCAGGATGCATTGCTCTGA-3'

RAGE: 晚期糖基化终产物受体; MMP-1: 基质金属蛋白酶-1; TIMP-1: 金属蛋白酶组织抑制因子-1.

表2 特异性siRNA对原代HSCs中RAGE、MMP-1、TIMP-1 mRNA表达的影响(2^-ΔΔCt) (n = 3)

分组	指标
分组	RAGE	TIMP-1	MMP-1
空白组	1.10±0.16^a	1.04±0.08^a	1.04±0.10^a
pAKD-GR126组	0.74±0.11	0.54±0.28	1.45±0.08
pAKD-NC组	1.06±0.07^a	1.01±0.10^a	0.99±0.17^a

^aP<0.05 vs pAKD-GR126组. siRNA: 小干扰RNA; HSCs: 肝星状细胞; RAGE: 晚期糖基化终产物受体; MMP-1: 基质金属蛋白酶-1; TIMP-1: 金属蛋白酶组织抑制因子-1.

表3 特异性siRNA对原代HSCs RAGE、MMP-1、TIMP-1蛋白相对表达灰度的统计(GAPDH) (n = 3)

分组	指标
分组	RAGE	TIMP-1	MMP-1
空白组	1.03±0.08^a	1.06±0.10^a	1.07±0.05^a
pAKD-GR126组	0.24±0.05	0.36±0.14	2.33±0.23
pAKD-NC组	1.02±0.14^a	1.05±0.09^a	1.08±0.13^a

^aP<0.05 vs pAKD-GR126组. siRNA: 小干扰RNA; HSCs: 肝星状细胞; RAGE: 晚期糖基化终产物受体; MMP-1: 基质金属蛋白酶-1; TIMP-1: 金属蛋白酶组织抑制因子-1.

表4 特异性siRNA对HF大鼠肝脏中RAGE、MMP-1、TIMP-1 mRNA表达的影响(2^-ΔΔCt) (n = 3)

分组	指标
分组	RAGE	TIMP-1	MMP-1
FM组	1.02±0.11^a	1.07±0.04^a	1.03±0.13^a
NS组	1.05±0.16^a	1.08±0.08^a	1.08±0.05^a
LT组	0.64±0.05^a^c	0.66±0.22^a^c	1.67±0.18^a^c
MT组	0.48±0.13^a^c	0.48±0.07^a^c	2.01±0.19^a^c
HT组	0.29±0.05^c	0.35±0.14^c	2.51±0.47^a^c
NC组	0.19±0.03	0.25±0.08	3.23±0.24

^aP<0.05 vs NC组;

^cP<0.05 vs FM组. FM: 模型组; NS: pAKD-NC组; LT: 小剂量治疗组; MT: 中剂量治疗组; HT: 大剂量治疗组; NC: 空白对照组. siRNA: 小干扰RNA; HF: 肝纤维化; RAGE: 晚期糖基化终产物受体; MMP-1: 基质金属蛋白酶-1; TIMP-1: 金属蛋白酶组织抑制因子-1.

表5 特异性siRNA对HF大鼠肝脏组织RAGE、MMP-1、TIMP-1蛋白相对表达灰度的统计(GAPDH) (n = 3)

分组	指标
分组	RAGE	TIMP-1	MMP-1
FM组	1.06±0.04^a	1.03±0.08^a	1.09±0.12^a
NS组	1.05±0.15^a	1.09±0.18^a	1.04±0.09^a
LT组	0.75±0.08^a^c	0.72±0.17^a^c	1.82±0.14^a^c
MT组	0.48±0.12^a^c	0.59±0.08^a^c	2.46±0.35^a^c
HT组	0.36±0.21^a^c	0.35±0.13^a^c	3.10±0.13^c
NC组	0.12±0.04	0.25±0.05	3.82±0.62

^aP<0.05 vs NC组;

表6 特异性siRNA对HF大鼠肝脏炎症活动度分级及纤维化程度的影响

分组	炎症活动度分级(A)					平均秩次	纤维化分期(B)					平均秩次
分组	0	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	平均秩次	0	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	平均秩次
FM组	0	0	0	1	5	30.00^b	0	0	0	0	6	30.50^b
NS组	0	0	0	2	4	28.50^b	0	0	0	1	5	29.00^b
LT组	0	0	2	3	1	21.67^b^d	0	0	1	4	1	22.00^b^d
MT组	0	2	2	2	0	15.83^b^d	0	2	3	1	0	14.50^b^d
HT组	0	4	2	0	0	11.50^b^d	0	4	1	1	0	11.50^b^d
NC组	6	0	0	0	0	3.50	6	0	0	0	0	3.50

^bP<0.01 vs NC组;

^dP<0.01 vs FM组. A: 各组大鼠肝脏炎症活动度分级及秩和检验结果, χ² = 29.642, P<0.01; B: 各组大鼠肝脏纤维化程度分期及秩和检验结果, χ² = 31.826, P<0.01. FM: 模型组; NS: pAKD-NC组; LT: 小剂量治疗组; MT: 中剂量治疗组; HT: 大剂量治疗组; NC: 空白对照组.

引文著录: 刘阳, 夏金荣, 蔡晓刚. 晚期糖基化终产物受体特异性小干扰RNA对MMP-1和TIMP-1表达的影响. 世界华人消化杂志 2015; 23(19): 3012-3021