地龙2号对大鼠肝纤维化TGF-β1,MMP-13及TIMP-1 mRNA和蛋白表达的影响

表1 引物序列及大小

Primers	Sense	Anti-sense	Length(bp)
TGF-β1	5'-TATAGCAACAATTCCTGGCG-3'	5'-CATGGTGGTGAAGACGCCAG-3'	165
MMP-13	5'-TGACTATGCGTGGCTGGAA-3'	5'-AAGCTGAAATCTTGCCTTGGA-3'	355
TIMP-1	5'-CCACAGATATCCGGTTCGCCTACA-3'	5'-GCACACCCCACAGCCAGCACTAT-3'	218
G3PDH	5'-CCCTTCATTGACCTCAACTACATGG-3'	5'-CATGGTGGTGAAGACGCCAG-3'	209

表2 PCR扩增条件

mRNA	Enzyme	Denaturaling temp (℃)	Annealing temp (℃)	No. ofcycles	25 mmol/L MgCl2 (mL)
TGF-β1	TaqTM	95	52	35	1.8
MMP-13	DyNAzymeTM	94	52	30	1.2
TIMP-1	TaqTM	95	60	35	1.5
G3PDH	TaqTM	95	52	30	1.6

表3 TGF-β1 、MMP-13及TIMP-1mRNA在各组的表达

分组	n	TGF-β1	MMP-13	TIMP-1	MMP-13/TIMP-1
N	6	0.38±0.09	0.52±0.14	0.44±0.07	1.17±0.25
NC	6	0.37±0.17	0.51±0.13	0.50±0.10	1.05±0.29
M	9	0.90±0.29	0.62±0.21	2.48±1.18	0.34±0.28
PC	8	0.79±0.2	0.60±0.16d	1.48±0.64c	0.45±0.17d
Eh	7	0.68±0.16	1.69±0.75b	1.01±0.22b	1.69±0.71b
El	10	0.66±0.14a	1.82±0.71b	1.21±0.38b	1.65±0.94b

^aP <0.05,

^bP <0.01 vs M组;

^cP <0.05 vs Eh组;

^dP <0.01 vs Eh及El组.

表4 肝组织TGF-β1, MMP-13及TIMP-1蛋白表达显色指数

分组	n	TGF-β1	MMP-13	TIMP-1
N	6	2.00 ± 1.26	3.67 ± 2.07	3.33 ± 1.75
NC	6	1.17 ± 0.75	4.50 ± 2.17	4.00 ± 1.67
M	9	8.22 ± 2.99	4.67 ± 2.45	7.56 ± 3.40
PC	8	5.88 ± 3.48	5.75 ± 3.11	6.13 ± 2.36
Eh	7	3.14 ± 2.67b	7.71 ± 1.25a	3.57 ± 2.23b
El	10	3.60 ± 1.90b	8.50 ± 2.88b	3.30 ± 2.67b

^aP <0.05,

^bP <0.01 vs M组.