研究快报
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世界华人消化杂志. 2015-08-18; 23(23): 3742-3748
在线出版 2015-08-18. doi: 10.11569/wcjd.v23.i23.3742
图1
图1 CRIPSRi显著抑制肝细胞miR-122的表达. A: CRIPSRi抑制miR-122表达原理模式图. dCas9仅保留DNA识别能力而无内切酶活性的特点, 并将dCas9与KRAB转录抑制结构域融合, 当靶向miR-122启动子区的sgRNA存在时, 将抑制miR-122的转录; B: 设计靶向miR-122启动子TATA盒和转录起始位点TSS的sgRNA; C: 针对miR-122启动子区进行CRIPSRi, 显著抑制HepG2细胞miR-122的表达, dCas9代表对照组转染dCas9-KRAB和lentiGuide-Puro质粒组, dCas9+T1代表转染dCas9-KRAB和lentiGuide-Puro-sgT1质粒组, dCas9+T2代表转染dCas9-KRAB和lentiGuide-Puro-sgT2质粒组. bP<0.01 vs 对照组. CRIPSRi: CRISPR干扰; Cas: CRISPR相关基因.
图2
图2 CRIPSRi抑制肝细胞miR-122表达依赖于sgRNA的剂量. dCas9: 对照组转染dCas9-KRAB和lentiGuide-Puro质粒组; dCas9+T1: 转染dCas9-KRAB和lentiGuide-Puro-sgT1质粒组. sgT1分别为100、200及500 ng, 各组转染dCas9-KRAB质粒为250 ng. bP<0.01 vs 对照组. CRIPSRi: CRISPR干扰; Cas: CRISPR相关基因.
图3
图3 CRIPSRi增加肝细胞miR-122靶分子HMOX1和CyclinG1的表达. CRIPSRi提高了肝细胞miR-122靶分子HMOX1和CCNG1 mRNA的转录水平. 针对miR-122启动子区进行CRIPSRi, 显著上调了HMOX1 mRNA和CCNG1 mRNA的表达. bP<0.01 vs 对照组; B: CRIPSRi增加肝细胞miR-122靶分子HMOX1蛋白的表达. 针对miR-122启动子区进行CRIPSRi, HMOX1蛋白的表达增加; C: CRIPSRi增加肝细胞miR-122靶分子CyclinG1蛋白的表达. 针对miR-122启动子区进行CRIPSRi, CyclinG1蛋白的表达增加. CRIPSRi: CRISPR干扰.
引文著录: 赵洪礼, 李洪运, 毛德华, 李桂玲, 黄勇. CRISPRi靶向调控HCV复制相关miR-122的表达. 世界华人消化杂志 2015; 23(23): 3742-3748