幽门螺杆菌培养及抗原蛋白的分离纯化

表2 H pylori抗原蛋白的重组表达

抗原蛋白	基因提取	重组载体	转化细菌	诱导表达	结果	参考文献
Urease	酚/氯仿抽提	pHP802	E.coli HB101, DH5a	IPTG诱导表达, LA液体培养基	Western blot证实获得UreB重组蛋白扩增出的ure基因和基因库中的相同, Western blot检测到特异性蛋白条带	Hu et al[45], 1992
Urease	CTAB法抽提	pIRES	减毒沙门氏菌LB5000	IPTG诱导表达, LB培养液		徐灿 et al[46]2005
Urease	基因组抽提试剂盒	pET28	E.coli BL21	IPTG诱导表达, LB培养液	PCR扩增出414 bp的目的片段, 免疫印迹表明、重组蛋白能够被特异性血清识别	袁小澎 et al[47]2007
VacA	酚/氯仿抽提	pMM592	E.coli ER2566	IPTG诱导表达, TBKAN培养液	免疫印迹分析, 能与H pylori(+)患者血清发生结合, ELASA检验重组蛋白有良好的抗原性	McClain et al[48], 2003
VacA	酚/氯仿抽提	pQE31	E.coli M15	IPTG诱导表达, LA培养液	SDS-PAGE显示表达产物Mr为37 000和58 000	杨贵珍 et al[49], 2006
VacA	碱裂解法	pET32a	E.coli BL21	IPTG诱导表达, LB培养液	ELASA检验重组蛋白有良好的抗原性	段秀杰 et al[50], 2006
CagA	基因组提取	pMD18-T, 试剂盒	E.coli TOP10 pGEX-4T-1	IPTG诱导表达, LB培养液	SDS-PAGE显示表达产物Mr为37 000和60 000, 免疫印迹分析, 能与H. pylori(+)患者血清发生结合	宁云山 et al[51],2006
CagA	基因组提取 试剂盒	pMG36e	L. lactis	IPTG诱导表达	DNA序列分析表明重组基因与原基因有97.4%的一致性, Western bolt 2006证实了重组蛋白的存在及强的免疫原性	Kim et al[52], 2006
CagA	基因组提取 试剂盒	pET42a	E.coli BL21	IPTG诱导表达, LB培养液	该抗原检测抗体的敏感性为92.9%	张静 et al[53], 2005