"健脾和胃祛湿方"对大鼠肝组织CYP450酶作用和初步机制

表1 不同CYP450亚型的特异探针浓度

亚型	探针	浓度(μmol/L)
CYP1A2	非那西丁	10
CYP2C9	甲苯磺丁脲	100
CYP2C19	奥美拉唑	5
CYP2D6	右美沙芬	2.5
CYP2E1	氯唑沙宗	20
CYP3A4	硝苯地平	5

表2 用于PCR的引物

亚型名称	引物(5'-3')
CYP1A2	上游: 5'-CTTTGACAAGAACAGTGTCCG-3'
	下游: 5'-AGTGTCCAGCTCCTTCTGGAT-3'
CYP2C9	上游: 5'-GGACAGAGACGACAAGCACA-3'
	下游: 5'-AGTGAAAGATGGATAATGCCCC-3'
CYP2C19	上游: 5'-TACCTCATTCCCAAGGGCAC-3'
	下游: 5'-GATAGTGAAATTTGGACCAGAGGA-3'
CYP2D6	上游: 5'-TGATGAGAACCTGCGCATAG-3'
	下游: 5'-ACCGATGACAGGTTGGTGAT-3'
CYP2E1	上游: 5'-AAACAGGGTAATGAGGCCCG-3'
	下游: 5'-TCATGCACCACAGCATCCAT-3'
CYP3A4	上游: 5'-CCGGGCTTCTGGGGTGTTCC-3'
	下游: 5'-GGCGAGGTGATGGCGAGGTAGC-3'
β-actin	上游: 5'-TCCGGAAAGATCTGTGCTCT-3'
	下游: 5'-AGGGAGATCTGGTCCTCGAT-3'

表3 大鼠肝微粒体CYP450各亚型6种探针药物浓度值 (μmol/L)

分组	CYP1A2	CYP2C9	CYP2C19	CYP2D6	CYP2E1	CYP3A4
空白组	9.768±0.12	99.862±5.03	4.869±0.56	2.467±0.02	19.798±2.98	4.893±0.51
中药组(高)	5.243±0.91b	97.452±2.35	4.872±0.36	2.032±0.11	18.365±3.51	4.654±0.24
中药组(中)	6.661±0.89b	98.528±1.36	4.798±0.42	2.124±0.23	18.698±2.52	4.963±0.69
中药组(低)	8.231±0.88a	98.823±1.68	4.920±0.13	2.212±0.32	18.823±2.92	4.698±0.10
苯巴比妥组	4.755±0.46b	44.987±2.21b	2.15±0.09b	1.267±0.17b	8.965±0.75b	2.086±0.21b

^aP<0.05,

^bP<0.01 vs 空白组.

表4 中药组(高、中、低浓度)对CYP450各亚型蛋白表达水平的影响 (n = 4, mean±SD)

分组	CYP1A2	CYP2C9	CYP2C19	CYP2D6	CYP2E1	CYP3A4
空白组	1.00±0.00	1.00±0.00	1.00±0.00	1.00±0.00	1.00±0.00	1.00±0.00
中药组(高)	0.34±0.03b	1.02±0.15	1.04±0.06	0.92±0.11	1.05±0.11	1.04±0.10
中药组(中)	0.51±0.09b	1.10±0.12	0.96±0.04	1.09±0.13	0.98±0.12	1.08±0.09
中药组(低)	0.84±0.12a	0.93±0.08	0.97±0.13	0.92±1.02	0.94±0.07	0.99±0.11
苯巴比妥组	0.41±0.06b	0.46±0.07b	0.68±0.09b	0.41±0.03b	0.51±0.08b	0.61±0.07b

^aP<0.05,

^bP<0.01 vs 空白组.

表5 中药组(高、中、低浓度)对CYP450各亚型mRNA水平的影响 (n = 4, mean±SD)

分组	CYP1A2	CYP2C9	CYP2C19	CYP2D6	CYP2E1	CYP3A4
空白组	1.00±0.00	1.00±0.00	1.00±0.00	1.00±0.00	1.00±0.00	1.00±0.00
中药组(高)	0.24±0.11b	0.92±0.05	0.92±0.06	0.92±0.11	0.95±0.08	0.94±0.04
中药组(中)	0.31±0.09b	0.95±0.06	0.98±0.02	0.94±0.03	0.98±0.02	0.93±0.09
中药组(低)	0.51±0.08b	0.93±0.08	0.96±0.07	0.92±0.02	0.92±0.12	0.98±0.01
苯巴比妥组	0.39±0.06b	0.42±0.07b	0.49±0.09b	0.59±0.10b	0.64±0.09b	0.24±0.03b

^bP<0.01 vs 空白组.