研究快报
Copyright ©The Author(s) 2015.
世界华人消化杂志. 2015-03-18; 23(8): 1290-1297
在线出版 2015-03-18. doi: 10.11569/wcjd.v23.i8.1290
表1 引物序列及反应条件
基因序列PCR反应条件片段长度(bp)
GAPDH上游: 5'-GTCGGTGTGAACGGATTT-3' 94 ℃预变性3 min; 94 ℃变性30 s, 57 ℃退火30 s, 72 ℃延伸45 s, 25个循环; 72 ℃延伸10 min 277
下游: 5'-ACTCCACGACGTACTCAGC-3'
TFF3上游: 5'-ATGGAGACCAGAGCCTTCTG-3' 94 ℃预变性3 min; 94 ℃变性30 s, 56 ℃退火30 s, 72 ℃延伸45 s, 30个循环; 72 ℃延伸10 min 403
下游: 5'-ACAGCCTTGTGCTGACTGTA-3'
STAT3上游: 5'-CACAACCTGCGAAGAATCAAG-3' 94 ℃预变性3 min; 94 ℃变性30 s, 55 ℃退火30 s, 72 ℃延伸45 s, 30个循环; 72 ℃延伸10 min 184
下游: 5'-GCTGCTTCTCCGTCACTAC-3'
STAT6上游: 5'-GGGGACTGCTACCAGAACACT-3' 94 ℃预变性3 min; 94 ℃变性30 s, 58 ℃退火30 s, 72 ℃延伸30 s, 30个循环; 72 ℃延伸10 min 358
下游: 5'-ATCTGTGAGGAGCCATCCTG-3'
NF-κB上游: 5'-GACCAGGAAGTCAGCGAGTC-3' 94 ℃预变性3 min; 94 ℃变性30 s, 54 ℃退火30 s, 72 ℃延伸45 s, 30个循环; 72 ℃延伸10 min 176
下游: 5'-TCCAGAGGGACAGCTCTTGT-3'
表2 不同浓度IL-22处理IEC-6后各时间点TFF3 mRNA表达水平比较 (n = 5, mean±SD)
浓度(ng/mL)时间
FP
0 h12 h24 h48 h
1 0.26±0.01 0.31±0.01 0.33±0.02 0.34±0.02 2.01 0.062
10 0.26±0.01 0.36±0.02a0.47±0.02acg0.52±0.03acg121.58 0.000
100 0.26±0.01 0.48±0.03agi0.62±0.04acgi0.73±0.05acegi389.05 0.000
F0.000 44.320 150.390 214.620
P1.000 0.021 0.000 0.000
表3 不同浓度IL-22处理IEC-6后各时间点STAT3 mRNA表达水平比较 (n = 5, mean±SD)
浓度(ng/mL)时间
FP
0 h12 h24 h48 h
1 0.32±0.01 0.34±0.01 0.35±0.04 0.37±0.02 1.90 0.054
10 0.32±0.01 0.35±0.02 0.46±0.05acg0.58±0.05aceg134.05 0.006
100 0.32±0.01 0.36±0.03 0.48±0.05acg0.60±0.05aceg142.59 0.005
F0.000 44.320 86.240 137.680
P1.000 0.073 0.026 0.009
表4 不同浓度IL-22处理IEC-6后各时间点NF-κB mRNA表达水平比较 (n = 5, mean±SD)
浓度(ng/mL)时间
FP
0 h12 h24 h48 h
1 0.46±0.02 0.44±0.02 0.47±0.02 0.49±0.04 2.27 0.097
10 0.46±0.02 0.46±0.03 0.49±0.04 0.50±0.03 2.27 0.094
100 0.46±0.02 0.45±0.01 0.48±0.03 0.52±0.04 2.371 0.087
F0.000 1.912 2.007 1.832
P1.000 0.183 0.146 0.169

引文著录: 林雪, 刘之枫, 丁玉华, 王帆, 潘华勤, 李瑾. IL-22对肠上皮细胞肠三叶因子的调控作用. 世界华人消化杂志 2015; 23(8): 1290-1297