shRNA maspin/pGenesil-1.1表达载体的构建及意义

表1 maspin shRNA的序列及结构

shRNA	序列及结构
maspin/pGenesil	5'-CACC GTGGCCCTATCAAATGTTA TTCAAGACG TAACATTTGATAGGGCCAC TTTTTT G-3'
	5'- AGCTCAAAAAA GTGGCCCTATCAAATGTTA CGTCTTGAA TAACATTTGATAGGGCCAC-3'
YX/pGenesil	5'-CACCGACTTCATAAGGCGCATGCTTCAAGACGGCATGCGCCTTATGAAGTC TTTTTT G-3'
	5'-AGCTCAAAAAAGACTTCATAAGGCGCATGC CGTCTTGAAGCATGCGCCTTATGAAGTC

CACC: 人工插入序列; TTTTTT和AAAAAA: 终止序列; TTCAAGACG和CGTCTTGAA: 茎环; AGCTC: SalⅠ酶切位点.

表2 合成的引物序列

名称	引物序列	大小(bp)
maspin	5'-CTCCAGGCCCGCAATGGAT-3'	1240
	5'-GGGCTATGCCAC TAAGGAG-3'
GAPDH	5'-CCATGGAGAAGGCTGGGG-3'	208
	5'-CAAAGTTGTCATGGATGA-3'

表3 maspin/pGenesil、YX/pGenesil及脂质体组细胞maspin mRNA灰度值(mean±SD)

分组	maspin	GAPDH	比率
Lipofectamine	839.0±70.3	1578.5±109	0.531±0.02
YX/pGenesil	802.3±76.4	1571.6±80.3	0.510±0.01
maspin/pGenesil	203.1±10.6	1588.6±90.5	0.127±0.02a

^aP<0.05 vs YX/pGenesil组.

表4 MKN-28 maspin蛋白表达的灰度值(mean±SD)

分组	maspin	GAPDH	比率
Lipofectamine	25331.62±2166.22	38142.45±4566.32	0.66±0.12
YX/pGenesil	24996.12±3095.28	38562.70±3912.55	0.65±0.09
maspin/pGenesil	9121.15±1897.02	38384.29±3124.36	0.24±0.10b

^aP<0.05 vs YX/pGenesil组.