结直肠癌中miRNAs差异表达谱的筛查

表1 结直肠癌组织标本临床资料

临床资料	基因芯片用标本	RT-PCR用标本
n	11	53
性别
男	5	29
女	6	24
年龄(岁)
中位(范围)	57(47-82)	61(41-83)
病理分级
高	2	23
中	8	12
低	1	18
临床分期
Ⅰ-Ⅱ	3	26
Ⅲ-Ⅳ	8	27
淋巴转移
有	7	31
无	4	22
远处转移
有	1	11
无	10	42
部位
结肠	2	20
直肠	9	33

表2 miRNAs引物序列

基因名称	引物		序列 5'-3'
hsa-miR-31	RT-Primer		GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGG
			TATTCGCACTGGATACGACAGCTAT
	PCR-Primer	Forward Primer	AGGCAAGATGCTGGCATAGCT
		Reverse Primer	CAAGGCAAGATGCTGGCATA
hsa-miR-105	RT-Primer		GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGG
			TATTCGCACTGGATACGACACAGGA
	PCR-Primer	Forward Primer	TCAAATGCTCAGACTCCTGT
		Reverse Primer	GCGTCAAATGCTCAGACTCC
hsa-miR-196b	RT-Primer		GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGG
			TATTCGCACTGGATACGACGAAGGC
	PCR-Primer	Forward Primer	TCGACAGCACGACACTGCCTTC
		Reverse Primer	TCGACAGCACGACACTGCC
U6	RT-Primer		AACGCTTCACGAATTTGCGT
	PCR-Primer	Forward Primer	CTCGCTTCGGCAGCACA
		Reverse Primer	GTGCAGGGTCCGAGGT

表3 结直肠癌中明显表达上调的miRNAs

miRNA	log2Ratio
hsa-miR-31	21.0559
hsa-miR-767-5p	13.9791
hsa-miR-105	11.7936
hsa-miR-196b	9.288
hsa-miR-224	9.1227
hsa-miR-483-5p	9.0639
hsa-miR-1246	7.6698
hsa-miR-196b	6.815
hsa-miR-663b	6.5095
hsa-miR-141	6.1256
hsa-miR-584	5.6565
hsa-miR-18a	5.65
hsa-miR-19a	5.3913
hsa-miR-452	5.2654
hsa-miR-622	5.2073

表4 结直肠癌中明显表达下调的miRNAs

miRNA	log2Ratio
hsa-miR-215	-15.87301587
hsa-miR-4298	-6.075334143
hsa-miR-139-5p	-6.042296073
hsa-miR-490-5p	-5.586592179
hsa-miR-3201	-4.518752824
hsa-miR-363	-3.976143141
hsa-miR-187	-3.755163335
hsa-miR-133a	-3.946329913
hsa-miR-1825	-3.6900369
hsa-miR-30a	-3.584229391

表5 CRC患者miR-31、miR-105、miR-196b表达与临床病理之间的关系 [M(Q4)]

分组	n	miR-31	miR-105	miR-196b
结直肠癌组织	53	18.40(14.8)b	30.56(16.08)b	19.38(12.42)b
癌旁正常组织	15	5.73(3.21)	6.62(4.12)	4.20(2.51)
病理分级
高	23	10.32(11.86)d	19.35(7.16)c	11.32(3.31)c
中	12	11.20(4.84)c	22.30(9.73)c	12.30(4.42)c
低	18	20.83(6.8)	32.04(4.22)	22.07(4.3)
淋巴结转移
阴性	22	15.21(8.86)	18.66(3.4)	15.02(7.62)
阳性	31	17.05(9.79)	32.03(7.14)f	19.10(7.69)
远处转移
无	42	13.02(8.01)	19.23(2.3)	14.90(6.63)
有	11	17.23(13.79)	30.07(11.99)h	18.93(9.73)
临床分期
Ⅰ	11	10.07(7.81)	17.02(4.38)	13.16(4.82)
Ⅱ	15	13.23(7.01)	18.52(5.08)	12.05(4.93)
Ⅲ	16	18.06(9.74)i	25.37(5.17)i	17.83(7.78)
Ⅳ	11	17.23(5.96)i	32.20(13.87)j	19.42(11.73)

^bP<0.01 vs 癌旁正常组织;

^cP<0.05,

^dP<0.01 vs 低分化组;

^fP<0.01 vs 无淋巴结转移组;

^hP<0.01 vs 无远处转移组;

ⁱP<0.05,

^jP<0.01 vs I期.