下调缺氧诱导因子-1α表达对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

表1 肝癌及癌周组织总RNA及HIF-1α表达的分析 ( n = 35)

分组	总RNA(µg/mg)	HIF-1α(强度)				阳性n(%)
	(mean± SD)	-	＋	＋＋	＋＋＋
癌灶	12.4 ± 7.3	7	21	7	0	28(80.0)
癌旁	53.8 ± 52.0b	0	10	18	7	35(100)b

^bP<0.01 vs 癌灶. HIF-1α: 缺氧诱导因子-1α.

表2 HIF-1α干扰后基因的Ct与△Ct值变化与比较 ( n = 3)

分组	24 h			48 h			72 h
	CtHIF-1α	CtGAPDH	△Ct	CtHIF-1α	CtGAPDH	△Ct	CtHIF-1α	CtGAPDH	△Ct
空白	19.20	14.70	4.50	16.30	13.20	3.10	16.80	13.60	3.20
	19.30	14.80	4.50	16.00	12.90	3.10	16.80	13.20	3.60
	19.50	14.80	4.70	16.20	12.70	3.50	17.00	13.40	3.60
阴性	17.90	13.50	4.40	16.60	13.50	3.10	18.80	15.20	3.60
	18.30	13.30	5.00	16.70	13.00	3.70	18.80	15.00	3.80
	18.10	13.40	4.70	16.50	13.30	3.20	19.20	15.40	3.80
干扰	18.90	13.60	5.30	18.50	13.80	4.70	23.10	16.80	6.30
	18.90	13.80	5.10	18.30	13.60	4.70	23.50	16.70	6.80
	18.90	14.00	4.90	18.00	13.60	4.40	23.20	17.10	6.10

△Ct = Ct(HIF-1α)-Ct(GAPDH). HIF-1α: 缺氧诱导因子-1α.

表3 miRNA干扰后HIF-1α基因相对定量与效率 ( n = 3)

分组	24 h			48 h			72 h
	△Ct均值	△△Ct	2-△△Ct	△Ct均值	△△Ct	2-△△Ct	△Ct均值	△△Ct	2-△△Ct
空白	4.57	0.00	1.00	3.23	0.00	1.00	3.47	0.00	1.00
阴性	4.70	0.13	0.91	3.30	0.10	0.93	3.73	0.27	0.83
干扰	5.10	0.53a	0.69	4.60	1.37	0.39ac	6.40	2.93	0.13ace

^aP<0.05 vs 组内空白组;

^cP<0.05 vs 24 h干扰组;

^eP<0.05 vs 48 h干扰组. △△Ct = △Ct_样本-△Ct_空白, 2^-△△Ct即为各组相对于空白组的干扰效率. HIF-1α: 缺氧诱导因子-1α.

表4 miRNA转染HepG2细胞周期时相的影响 (%)

分组		空白	阴性	miRNA	阿霉素	阿霉素+miRNA
48 h	G0/G1	37.91±2.05	40.12±1.64a	54.78±1.64a	57.48±0.71a	60.32±1.20ade
	S	46.48±2.44	43.75±2.10a	28.43±0.76a	27.31±1.32a	24.24±1.88ace
	G2/M	15.61±0.72	16.13±0.68	16.79±1.93	15.21±0.77	15.44±1.13
72 h	G0/G1	56.75±1.13	57.43±1.27a	61.49±1.12a	61.95±0.42a	65.68±0.91adf
	S	26.14±0.78	25.56±1.21a	22.40±0.58a	21.62±1.19a	19.47±1.34ace
	G2/M	17.11±0.36	17.01±0.26	16.11±1.41	16.43±1.61	14.85±2.07

^aP<0.05 vs 空白组, G₀/G₁期q_{48 h} = 4.47, q_{72 h} = 5.50;

^dP<0.01 vs miRNA组, S期q_{48 h} = 3.51, q_{72 h} = 3.48,

^cP<0.05 vs miRNA组, G₀/G₁期q_{48 h} = 3.54,

^eP<0.05, q_{72 h} = 4.50;

^fP<0.01, S期q_{48 h} = 2.24, q_{72 h} = 2.48; ^eP<0.05 vs 阿霉素组.

表5 miRNA转染促进HepG2细胞凋亡

分组	48 h凋亡(%)	q值	P值	72 h凋亡(%)	q值	P值
空白	3.80±0.12			8.01±0.71
阴性	4.84±0.23	2.10	0.062	9.38±0.44	1.34	0.081
miRNA	15.49±0.99a	23.65	0.000	22.46±0.61a	14.44	0.000
阿霉素	15.91±0.37a	24.50	0.000	27.52±1.31a	19.51	0.000
阿霉素+miRNA	27.33±0.94abd	47.40	0.000	36.99±0.88abd	28.98	0.000

^aP<0.05 vs 空白组; q_{48 h} = 23.75, q_{72 h} = 21.10,

^bP<0.01 vs miRNA组; q_{48 h} = 22.90, q_{72 h} =13.74,

^dP<0.01 vs 阿霉素组.