实时定量PCR法分析2型糖尿病患者肠道乳酸杆菌菌种数量的改变

表1 引物序列

目标细菌名称	F序列	R序列
乳酸杆菌	AGCAGTAGGGAATCTTCCA	CACCGCTACACATGGAG
嗜酸乳杆菌	GAAAGAGCCCAAACCAAGTGATT	CTTCCCAGATAATTCAACTATCGCTTA
保加利亚乳杆菌	GGRTGATTTGTTGGACGCTAG	GCCGCCTTTCAAACTTGAATC
干酪乳杆菌	GCACCGAGATTCAACATGG	GGTTCTTGGATYTATGCGGTATTAG
植物乳杆菌	TGGATCACCTCCTTTCTAAGGAAT	TGTTCTCGGTTTCATTATGAAAAAATA
鼠李糖乳杆菌	TGCTTGCATCTTGATTTAATTTTG	GTCCATTGTGGAAGATTCCC

表2 各标准品浓度

目标细菌	标准品原浓度(copies/mL)	标准品10倍系列稀释浓度(copies/mL)
乳酸杆菌	3.21×1013	3.21×104-3.21×1011
嗜酸乳杆菌	2.87×1013	2.87×103-2.87×1010
保加利亚乳杆菌	3.76×1013	3.76×103-3.76×1010
干酪乳杆菌	1.99×1013	1.99×103-1.99×1010
植物乳杆菌	2.18×1013	2.18×103-2.18×1010
鼠李糖乳杆菌	4.00×1013	4.00×103-4.00×1010

表3 糖尿病组与对照组基本信息统计

	糖尿病组(n = 50)	对照组(n = 30)	P值
性别(男/女)	23/27	17/13	0.3
年龄(岁)	60±8	61±9	0.7
BMI(kg/m2)	24.7±3.8	23.9±3.0	0.5

表4 糖尿病组代谢指标及炎症指标

指标	FBG(mmol/L)	餐后2 h PBG (mmol/L)	HbAIC(%)	TG(mmol/L)	TC(mmol/L)	LDL-C(mmol/L)	HDL-C(mmol/L)	CRP(mg/L)
糖尿病组	7.9±2.2	13.9±4.4	7.9±1.8	2.1±1.2	5.3±1.4	2.9±0.9	1.4±0.2	2.5±2.9
标准值	3.6-6.1	3.6-7.8	4.0-6.0	0.4-1.8	3.4-6.0	2.0-4.1	0.7-1.9	0-3.0

表5 两组间乳酸杆菌属及具体菌种数量比较

	糖尿病组(n = 50)		对照组(n = 30)		P值
	中位数	平均秩次	中位数	平均秩次
乳酸杆菌	7.7850	51.86	6.5750	21.57	<0.001
嗜酸乳杆菌	4.2650	48.63	2.7450	26.95	<0.001
保加利亚乳杆菌	5.0026	48.66	4.5782	26.90	<0.001
干酪乳杆菌	4.8432	45.78	4.3028	31.70	0.008
植物乳杆菌	4.4025	39.94	4.6255	41.43	0.786
鼠李糖乳杆菌	3.6017	50.92	2.6007	23.13	<0.001