实时荧光定量RT-PCR检测结直肠癌中外周血端粒酶逆转录酶mRNA的表达及其临床意义

表1 PCR引物序列

目的基因	序列	产物长度(bp)
hTERT	正义5'-CAGCTCCCATTTCATCAGCAA-3'	115
	反义5'-GCGACATCCCTGCGTTCTT-3'
GAPDH	正义5'-TCATGGGTGTGAACCATGAGAA-3'	146
(内参照)	反义5'-GGCATGGACTGTGGTCATGAG-3'

表2 各组外周血hTERT mRNA的阳性表达水平(mean±SD, 2^-△△Ct)

分组	n	hTERT mRNA	t'值	P
肿瘤组	53	13.9990±7.7552	7.953	<0.05
对照组	21	0.4770±0.3855

表3 结直肠癌患者外周血hTERT mRNA表达与临床参数的关系

临床参数	n	hTERTmRNA表达	t值或t'值	P值
性别			0.483	0.631
男	34	13.6119±7.2253
女	19	14.6918±8.7891
年龄			1.070	0.319
<50	16	12.3686±7.3889
≥50	37	14.7040±7.9014
肿瘤直径(cm)			0.350	0.728
<5	30	14.3280±6.7292
≥5	23	13.5699±9.0623
分化程度:			0.308	0.760
高中分化	24	14.3623±6.8191
低未分化	29	13.6983±8.5610
浸润深度			0.518	0.607
未及浆膜	18	13.2245±5.9136
浸及浆膜	35	14.3973±5.6523
淋巴结转移			2.334	0.024
无转移	28	11.7445±8.2543
有转移	25	16.5240±6.4099
血行转移			2.149	0.036
无转移	35	12.4113±8.9409
有转移	18	17.0861±2.9671
TNM分期			2.460	0.017
Ⅰ-Ⅱ	27	11.5443±8.3420
Ⅲ-Ⅳ	26	16.5481±6.2816

表4 结直肠癌患者外周血hTERT mRNA检测各截断点诊断价值分析

指标	截断点Ct值	结直肠癌组阳性例数(n)	正常对照组阳性例数(n)	敏感性(%)	特异性(%)	PPV(%)	NPV(%)
hTERT	<20	9	0	17.0	100.0	100.0	32.3
mRNA	<24	33	1	62.3	95.2	97.1	50.0
	<28	41	2	77.4	90.5	95.3	61.3
	≤32	47	2	88.7	90.5	95.9	76.0
	>32	6	19	11.3	9.5	24.0	4.1
	>36	3	15	5.7	28.6	16.7	10.7