血清饥饿对结肠癌HCT116细胞外泌体分泌的影响

图1 血清饥饿和非血清饥饿培养条件下结肠癌HCT116细胞形态比较(×400). A: 无血清培养前HCT116细胞; B: 添加无外泌体血清培养前HCT116细胞; C: 无血清培养24 h后HCT116细胞; D: 添加无外泌体血清培养24 h后HCT116细胞.

图2 两种培养条件提取的外泌体形态电镜观察(×80000). A: 无血清培养条件下外泌体形态和大小; B: 添加无外泌体血清培养条件下外泌体形态和大小. 负染法显示外泌体周边光滑, 呈圆形或椭圆形, 由脂质双分子层包裹, 大小在40-100 nm之间.

图3 两种培养条件外泌体分泌量的比较. A: 无血清和无外泌体血清两种培养方法分泌的外泌体的大小和数量分布图; B: 无血清和无外泌体血清两种培养方法分泌的外泌体的浓度统计柱状图. ^bP<0.01 vs Serum starvation组.

图4 外泌体标志蛋白的免疫印迹分析. 添加无外泌体血清和无血清两种培养条件分别培养HCT116, 超速离心法提取外泌体, 50 μg外泌体蛋白裂解液经10%的SDS-PAGE分离, 蛋白免疫印迹技术检测到外泌体的标志性蛋白HSP70和CD63. 1: 添加无外泌体血清组; 2: 血清饥饿组.