pHBx-EGFP载体构建及其在肝癌Bel 7402细胞中的表达

图1 pHBx-EGFP真核表达载体酶切鉴定. M: DNA Marker; 1: pHBx-EGFP载体用Hind Ⅲ+EcoRⅠ消化; 2: pEGFP载体用Hind Ⅲ+EcoRⅠ消化. EGFP: 增强型绿色荧光蛋白; HBx: 乙型肝炎病毒-X蛋白.

图2 重组载体HBx部分测序图及Blast比对结果. A: 构建的载体经基因测序的HBx部分序列; B: 基因库里的HBx序列与测序结果进行BLAST比对. HBx: 乙型肝炎病毒-X蛋白.

图3 pEGFP和pHBx-EGFP转染Bel 7402细胞的倒置荧光显微镜观察. A, D, G: 可见光下观察的细胞, B, C, E, F, H, I: 荧光下观察的细胞; A-C: 没有转染载体的Bel 7402(空白对照); D-F: Bel 7402转染pEGFP载体; G-I: Bel 7402转染pHBx-EGFP融合基因载体. A, B, C, D, E, G, H(×100); F, I分别是E和H的放大图像(×400), n = 3. EGFP: 增强型绿色荧光蛋白; HBx: 乙型肝炎病毒-X蛋白.

图4 HBx-EGFP融合蛋白在Bel 7402细胞中的表达. A: 应用GFP一抗检测蛋白质的表达; B: 应用HBx一抗检测蛋白的表达. 1: 转染pHBx-EGFP融合载体的蛋白质; 2: 转染pEGFP空载体的蛋白. EGFP: 增强型绿色荧光蛋白; HBx: 乙型肝炎病毒-X蛋白.