HBx基因缺失突变体HBx-d382对L02细胞增殖及非锚定依赖生长能力的影响

图1 重组质粒的鉴定. A: PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳结果; 1: pcDNA3.0/HBx; 2: pcDNA3.0/HBx-d382; 3: pcDNA3.0; B: 双酶切鉴定重组质粒结果; 1: pcDNA3.0酶切后; 2: pcDNA3.0酶切前; 3: 重组质粒pcDNA3.0/HBx-d382酶切后; 4: 重组质粒pcDNA3.0/HBx-d382酶切前; 5: 重组质粒pcDNA3.0/HBx酶切后; 6: 重组质粒pcDNA3.0/HBx酶切前; M: DNA分子量标准(bp).

图2 L02细胞转染后基因组DNA HBx基因及其表达的鉴定. A: PCR扩增基因组DNA; B: RT-PCR鉴定目的基因的表达; C: Western blot鉴定目的基因表达; M: DNA分子量标准(bp); 1: L02细胞组; 2-4: 分别代表转染空质粒、转染重组质粒pcDNA3.0/HBx-d382以及转染重组质粒pcDNA3.0/HBx后L02细胞组.

图3 MTT检测细胞增殖.

图4 软琼脂克隆形成实验. A: L02(×50); B: L02/HBx-d382(×50); C: L02/HBx-d382(×200); D: L02/pcDNA3.0(×50); E: L02/HBx(×50). ^bP<0.01 vs L02组; ^dP<0.01 vs L02/HBx组.

图5 细胞周期检测. A: L02/pcDNA3.0组; B: L02组; C: L02/HBx-d382组; D: L02/HBx组.