大肠癌细胞系Lovo中亚群(SP)细胞的分离培养和鉴定

图1 Lovo中肿瘤细胞球的形成过程. A: 在SFM中培养24-48 h(×100); B: 在SFM中培养1 wk左右(×100); C: 在SFM中培养3 wk左右(×400); D: 在SSM中培养48 h(×100).

图2 有限稀释试验单克隆试验的直线回归分析. 以每孔中接种的细胞数为自变量, 以每个浓度未形成肿瘤球的孔的百分比为应变量, 作回归直线, 以应变量37%相对应的自变量的值就是要形成一个肿瘤球所需的细胞数.

图3 Lovo中SP细胞的自我更新(×100). A: SP; B: 单细胞.

图4 Lovo中SP细胞在加有血清的SFM中的分化过程(×100). A: 24-48 h内; B: 5 d; C: 7 d左右.

图5 Lovo在SSM和SFM两种培养基中交替转化. A: 将肿瘤球重铺于SSM中, 12 h内(×200); B: 24 h左右(×200); C: 48 h后(×200); D: 消化单层Lovo细胞, 重新培养于SFM中, 仍可形成肿瘤细胞球(×100).

图6 SP细胞Musashi-1染色结果(×400). A: Lovo细胞在SSM中培养24 h后, 只有极少量的细胞表达Musashi-1, 细胞核较圆, 并且比较小; B:Lovo细胞在SSM中培养24 h后, Musashi-1阴性的肿瘤细胞核呈长椭圆形, 核较大; C: Lovo中SP细胞在SFM中培养形成的肿瘤球表达Musashi-1; D: SP细胞分化培养7 d后, Musashi-1呈阴性表达.