J-HNP-1 多肽的重组及体外抗菌作用研究

图1 J 链PCR产物电泳图, 大小为489 bp. 1: DNA marker DL2000; 2, 3: J chain PCR产物.

图2 HNP-1 PCR产物电泳图, 大小为297 bp. 1: DNA marker DL2000; 2, 3: HNP-1 PCR产物.

图3 重组质粒rpcDNA3. 1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1阳性克隆的酶切鉴定. 1: DNA marker DL2000; 2, 8: rpcDNA3.1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1/ BamHⅠ阴性克隆; 3-7, 9: rpcDNA3.1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1/BamHⅠ阳性克隆.

图4 重组质粒rpcDNA3. 1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1中J-HNP-1插入子的DNA序列分析.

图5 经pcDNA3. 1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1转染的COS-7细胞的PCR扩增产物. 1: DNA marker DL2000; 2: normal COS-7; 3: with pcDNA3.1(-)/Myc-HisC; 4, 5, 6: with 100 mL/L, 0.2?mL/L, 0?mL/L fetal.

图6 Western Blot法分析转染rpcDNA3. 1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1的COS-7细胞J-HNP-1的表达. 1, 2/3, 4: rpcDNA3.1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1转染的COS-7细胞可溶性蛋白和培养上清; 5: 蛋白Marker; 6, 7/8, 9: pcDNA3.1(-)/Myc-HisC(即空质粒)转染的COS-7细胞可溶性蛋白和培养上清.

图7 经pcDNA3. 1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1转染的细胞可溶性蛋白及上清的抗菌活性试验. 1: 阳性抗菌药LVF; 2, 4: 转染pcDNA3.1(-)/Myc-HisC(即空质粒)的COS-7细胞的可溶性蛋白和培养上清; 3, 5: 经pcDNA3.1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1转染的COS-7细胞的可溶性蛋白和培养上清.