鼠CD40配体基因的克隆及表达

图1 鼠CD40配体RT-PCR产物琼脂糖凝胶电泳. 1: 目的产物; 2: DNA分子量标准(1 031 bp); 3: 阳性对照(β-actin).

图2 鼠CD40配体真核表达质粒双酶切鉴定结果. 1: DNA分子量标准(2 000 bp); 2: RT-PCR产物; 3: pcDNA3.1⁺-mCD40L经NheI和EcoRI双酶切; 4: pcDNA3.1⁺-mCD40L未酶切; 5:DNA分子量标准(10 000 bp).

图3 重组质粒序列测定结果. 测序结果表明包括起始密码子和终止密码子在内的完整的mCD40L基因插入表达质粒中.

图4 RT-PCR检测鼠CD40配体基因在H22细胞中的表达. 1: 8: DNA分子量标准(分别为2 000 bp和1 031 bp); 2: 空白载体转染H22细胞RT-PCR结果; 3-6: 重组质粒转染H22细胞RT-PCR结果; 7:鼠脾细胞RT-PCR结果.

图5 间接免疫荧光检测H22细胞中鼠CD40配体的表达. 有鼠CD40配体表达的H22细胞, 荧光染色呈阳性.