乙型肝炎病毒S基因系列单突变克隆人工构建

图1 SOEing PCR 扩增结果(图A, B, C). A: 泳道1为1 kb的Marker; 泳道2, 3, 4为126、133、144 位S基因上半段序列第1次扩增产物, 分子量大小为378 bp、399 bp和432 bp; B: 泳道3为1 kb的Marker, 泳道1, 2, 4, 5分别为126, 133和144, 144位S基因下半段序列第1次PCR扩增产物, 长度为380 bp、359 bp和326个bp(均含pcDNA3载体MCS位点及SP6启动子全长序列); C: 泳道4为123 bp的Marker; 泳道1为利用ZL, ZR扩增S基因的结果, 703 bp, 泳道2, 3, 5, 6 ZL和SP6R扩增相应模板的结果, 分别为126, 133, 144, 全长为758 bp (皆含有pcDNA3载体MCS位点及SP6启动子全长序列和相应的突变位点).

图2 系列突变克隆质粒转染后免疫荧光检测. A: Wild S; B: 阴性对照; C: T126S; D: M133L; E: 144A.