修回日期: 2020-12-29
接受日期: 2021-01-25
在线出版日期: 2021-02-28
胃癌(Gastric cancer, GC)作为消化系统常见的恶性肿瘤, 具有早期转移、晚期预后差的特点, 随着社会环境和饮食习惯的改变, 其发病率和死亡率呈上升趋势, 手术和化疗仍然是GC患者的主要治疗方法, 但疗效不佳. 鉴于目前的不利形势, 寻找一种对胃癌的诊断和治疗具有高度敏感性的生物标志物对胃癌患者具有重要的临床意义. 近年来, 微小RNA(microRNA, miRNA)被证明可作为抑癌基因或癌前基因, 其异常表达可能与肿瘤的发生有关. 表达与肿瘤的发生和发展密切相关, 因此通常被认为是癌症诊断或治疗的目标方向. miRNA作为一种小的非编码RNA, 通过与靶基因的3'UTR结合来调控靶基因的表达. 本研究从miRNA靶向基因方面探究其对胃癌细胞侵袭和迁移的影响及潜在机制.
本研究的主题是miR-139-5p对胃癌细胞侵袭和迁移的影响, 拟解决的问题是了解miR-139-5p如何影响胃癌细胞侵袭和迁移以及其和PAK5之间的关系, 随后探究miR-139-5p在胃癌发生发展的潜在机制, 以期为胃癌临床治疗提供新的靶点.
研究的主要目标是miR-139-5p对胃癌细胞侵袭和迁移影响的机制, 研究得到miR-139-5p在胃癌细胞中呈低表达, 而PAK5呈高表达, 过表达miR-139-5p能够抑制胃癌细胞侵袭和迁移, 且miR-139-5p能够靶向负调控PAK5, 此外, 过表达miR-139-5p能够阻断Wnt/β-catenin信号通路的激活. 本研究为胃癌的治疗提供新的思路.
本研究首先通过qRT-PCR和Western blot分别检测miR-139-5p和PAK5在胃癌细胞中的表达情况, 通过转染构建过表达miR-139-5p的细胞株, Transwell和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力, Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达情况, 双荧光素酶报告基因实验检测miR-139-5p和PAK5之间的靶向关系.
本研究结果是miR-139-5p在胃癌细胞中低表达, 而PAK5在胃癌细胞中异常高表达. 过表达miR-139-5p能够抑制胃癌细胞侵袭和迁移能力, 且能够靶向抑制PAK5的表达, 此外, 过表达miR-139-5p能够抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活, 达到了本研究的目的, 对胃癌发生和发展的分子机制有了进一步的的了解, 可应用于胃癌的临床治疗.
miR-139-5p能够靶向负调控PAK5的表达, 过表达miR-139-5p可通过阻断Wnt/β-catenin信号通路抑制胃癌细胞的侵袭和迁移. 尽管关于miRNA在胃癌中的作用机制的报道很多, 但其上游和下游机制仍然难以捉摸, 这是我们未来研究的另一个目的.
本研究只在体外细胞中研究了miR-139-5p对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响, 未涉及体内模型实验尚显不足, 且到临床上的应用相差甚远, 因此后续实验需在小鼠体内进行验证, 并且在未来的实验中, 我们开展更多的基础实验, 以弥补我们研究的不足.