基础研究
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世界华人消化杂志. 2021-01-28; 29(2): 65-74
Published online 2021-01-28. doi: 10.11569/wcjd.v29.i2.65
lncRNA LINC02418通过调控miR-940表达对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响
方燕, 陈建欧, 郑旭旭
方燕, 陈建欧, 郑旭旭, 温州市中医院病理科 浙江省温州市 325000
方燕, 病理主治医师, 研究方向为肿瘤学术研究, 加免疫组化和分子学
作者贡献分布: 本文撰写由方燕完成; 文献资料查找由陈建欧与郑旭旭共同完成; 方燕审校.
通讯作者: 方燕, 本科, 主治医师, 325000, 浙江省温州市瓯海区六虹桥路蛟尾巷9号, 温州市中医院病理科. fy1170710246@163.com
收稿日期: 2020-11-10
修回日期: 2020-12-02
接受日期: 2020-12-21
在线出版日期: 2021-01-28
文章亮点
实验背景

肝癌发病机制尚未明确, 已有研究显示lncRNA参与调控肝癌细胞恶性表型(增殖、凋亡、迁移和侵袭), 但LINC02418对肝癌细胞恶性表型的影响机制尚未可知.

实验动机

LINC02418在等肿瘤中表达升高, 参与调控肿瘤增殖、迁移和侵袭等恶性表型, 但其对肝癌细胞恶性表型的影响及作用机制尚未可知. LncBase Predicted v.2靶基因预测显示, LINC02418可能靶向结合miR-940. 以有报道称, miR-940在肝癌中呈低表达, 上调miR-940可减弱肝癌细胞的活力和侵袭性, 促进细胞凋亡,且抑制体内肿瘤生长. 但LINC02418能否靶向调控miR-940影响肝癌细胞的恶性表型也还未知. 因此, 探究LINC02418对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其能否靶向miR-940发挥作用, 以期为肝癌的靶向分子治疗提供新靶点.

实验目标

探究LINC02418对肝癌细胞恶性表型(增殖、迁移、侵袭和凋亡)的影响及其能否靶向miR-940发挥作用, 为肝癌的靶向治疗提供新的分子靶点.

实验方法

RT-qPCR检测肝癌组织和对应癌旁组织中LINC02418和miR-940表达. 分别转染LINC02418小干扰RNA、miR-940模拟物至肝癌细胞HCCLM3, RT-qPCR检测细胞中LINC02418或miR-940表达验证转染效果, CCK-8检测细胞增殖, Transwell检测细胞迁移和侵袭, 流式细胞术检测细胞凋亡, 蛋白印迹法检测细胞中CyclinD1、p21、MMP-2、MMP-9、Bcl-2和Bax蛋白表达. 双荧光素酶报告基因实验验证miR-940与LINC02418靶向调控关系.

实验结果

肝癌组织中LINC02418呈高表达, miR-940呈低表达. 下调LINC02418或上调miR-940可降低肝细细胞活性、迁移和侵袭数及CyclinD1、MMP-2、MMP-9和Bcl-2的蛋白表达, 但促进细胞凋亡率及p21和Bax蛋白表达. LINC02418可靶向结合并负调控miR-940, 下调miR-940逆转下调LINC02418对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及凋亡促进作用.

实验结论

肝癌组织中LINC02418表达升高, 下调LINC02418表达可降低肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力, 并加剧肝癌细胞凋亡, 其作用机制可能与靶向上调miR-940表达有关, 为肝癌的靶向分子治疗提供了新的分子靶点.

展望前景

miR-940下游靶基因及信号通路在肝癌发生发展中的作用还未知, 且本研究仅通过体外实验进行了初步探究, 尚需进一步通过裸鼠移植瘤实验在体内验证LINC02418/miR-940轴对肝癌发展的影响. LINC02418/miR-940轴可能为肝癌发生发展的分子机制的阐明提供了新思路并为其治疗提供了新的分子靶点.